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[标本处理] Pi-W和Pi-A去除粘连体的方法

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发表于 2018-7-6 10:39:53 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
各位大神,小弟最近在做细胞同步化,用秋水仙胺处理细胞,将其同步化到中期,然后用PI染色,流式检测中期细胞比例。分析时在Pi-W和Pi-A点图中去除粘连体细胞,以下是我的图,请问各位,该如何圈门?万分感谢!(Ps.另外,圈门之后,其他部分的点代表什么含义?)


我尝试着圈了不同的门,以下哪个比较合适?

Pi.png
pileft.png
pileft2.png
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发表于 2018-7-6 10:56:54 | 显示全部楼层
把数据发上来
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 楼主| 发表于 2018-7-6 15:55:07 | 显示全部楼层

您好,这是我的原始文件。

Experiment_730.zip

1.29 MB, 下载次数: 13

对照组+处理组

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发表于 2018-7-6 22:43:43 | 显示全部楼层
我觉得应该用FSC-W vs H 和 SSC-W vs H 吧,具体看图
06-Jul-2018-Layout.jpg
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 楼主| 发表于 2018-7-7 10:01:41 | 显示全部楼层
robert1988 发表于 2018-7-6 22:43
我觉得应该用FSC-W vs H 和 SSC-W vs H 吧,具体看图

这样子拟合效果不太好,在Pi-A和count的峰图上,G2/M期右边还会有一些峰,RCS检测显示拟合效果很差。
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 楼主| 发表于 2018-7-8 13:57:12 | 显示全部楼层
@niwanmao 倪老师,您好!想麻烦您看看,指点一下。谢谢老师!
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发表于 2018-7-8 21:41:01 | 显示全部楼层
zzp 发表于 2018-7-8 13:57
@niwanmao 倪老师,您好!想麻烦您看看,指点一下。谢谢老师!

存在三个峰,所以很难判断,对于这种倍体位置不明的,建议加一个倍体参照,例如鸡红细胞,或者正常人外周血淋巴细胞。
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发表于 2018-7-9 09:18:09 | 显示全部楼层
zzp 发表于 2018-7-6 15:55
您好,这是我的原始文件。

我感觉应该是多倍体
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发表于 2018-7-9 09:49:10 | 显示全部楼层
排除粘连体,第二个图是合适的
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 楼主| 发表于 2018-7-10 08:38:54 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-7-8 21:41
存在三个峰,所以很难判断,对于这种倍体位置不明的,建议加一个倍体参照,例如鸡红细胞,或者正常人外周 ...

倪老师,这是果蝇的S2R+细胞,Pi-W,Pi-A图里最上面一个细胞聚集区,是不是可以认为是四倍体细胞?我的目的是将细胞同步化到中期。。。
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