请教JC-1检测外周血淋巴细胞线粒体膜电位数据分析问题

飞哥哥爱你呦

各位专家好，我是流式菜鸟，接触流式没多久，用的流式仪是艾森，现在在做线粒体膜电位，样本为外周血淋巴细胞，图中3C,4C代表没有JC-1染色的，3、4代表JC-1染色的，现在有以下几个问题，1，淋巴细胞群为什么靠近噪音群，我在使用ATTUNE的时候使用同样的操作方法淋巴细胞群可以分得很开（见图-control和图-补偿后），2，倪老师反复强调圈出BL1升高BL2降低的细胞群，但我做的结果有相当多的案例是没有明显分开的这两群信号，3，如果不用十字门，只需画出不规则门，那是否还有必要调节补偿，这样以来control是否也无需再做了，4，艾森流式仪在调节补偿时轻微调节就会使右下方的信号掉到Q3-4中，难道是补偿调节不是这么操作的？。原始数据文件已在压缩包中，问题很白痴，请各位专家指出有哪些问题需要改进。

niwanmao

这个Attune的分析图吧，分群挺好的：



至于ACEA的仪器，可将补偿调大点，使两群分开，圈FL2降低的这群：

飞哥哥爱你呦

niwanmao 发表于 2018-7-17 18:12
这个Attune的分析图吧，分群挺好的：

谢谢倪老师，在调节补偿的时候经常会遇到好几群细胞信号，如图，你看选哪一群或几群作为早期凋亡细胞。

飞哥哥爱你呦

这新鲜外周血检测的结果，请教第三张图有明显的两群是什么意思啊，难道右边的那一群就是凋亡的细胞？

niwanmao

飞哥哥爱你呦 发表于 2018-7-30 09:09
这新鲜外周血检测的结果，请教第三张图有明显的两群是什么意思啊，难道右边的那一群就是凋亡的细胞？ ...

有点奇怪，反设门看看P4群的分布

飞哥哥爱你呦

niwanmao 发表于 2018-7-30 21:32
有点奇怪，反设门看看P4群的分布

P3P4反应在散点图上还是混杂在一起的，分不开