大鼠外周血IFN IL-4染不上

yxzxlmlf

各位大神，我最近做大鼠外周血的IFN和IL-4，裂红后加PMA Ionomycin BFA刺激5h（eBioscience 00-4975），然后染CD3 CD4，接着用eBioscience(88-8824)固定/破膜，染胞内因子，胞内怎么都染不上，刺激剂和固定破膜剂都试过别人的，还是染不上，找不到原因，想听听大伙的意见，不胜感激！

niwanmao

我的建议是：
1、仔细一步步对照http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6801-1-1.html中所述的步骤和试剂配制方法，看看哪里有没有出问题？
2、如果固定和破膜剂没有问题，确认一下IL-4抗体有没有问题？

yxzxlmlf

niwanmao 发表于 2018-7-25 12:49
我的建议是：
1、仔细一步步对照http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6801-1-1.html中所述的步骤和试剂配制 ...

IFN抗体买的BD的，IL-4抗体买的biolegend的，特意分开买，怕某个公司的不行。谢谢倪老师指点，我仔细对照下

phstudy

印象里大鼠的刺激方法和人、小鼠好象不一样，更复杂些
建议多查几篇做大鼠的文献参考一下，最好是国外实验室发的文章