流式分选4色荧光配色疑问

陈十七

需要做cd4+cd25-cd44-cd62L+流式分选，机器荧光通道如图所示。
现在已有cd4-fitc、cd25-pe、cd44-pe、cd62L-apc荧光抗体，只需换cd25或者cd44的荧光抗体即可，可以将cd44-pe换为cd44-pe-cy7吗？
cd44可选荧光：eFluor450、Alexa Fluor700、pe-cy7、Percp-cy5.5、pe-eFluor610
cd25可选荧光：APC-eFluor780、pe-cy7、Percp-cy5.5、pe-eFluor610
请老师指导

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niwanmao

建议换CD44为Alexa Fluor 700

robert1988

CD-25 PE-Cy7

陈十七

robert1988 发表于 2018-7-30 22:45
CD-25 PE-Cy7

请问老师为什么选择换cd25而不是cd44呢？求指教~

陈十七

niwanmao 发表于 2018-7-30 21:34
建议换CD44为Alexa Fluor 700

倪老师，在分选仪给出的荧光素中没有alexa fluor700也可以用吗？它是和apc-alexa700差不多的荧光吗？我查了一下说它需要685LP镜和710/720滤光片，不太确定学校的分选仪有没有。

robert1988

陈十七 发表于 2018-8-1 13:52
请问老师为什么选择换cd25而不是cd44呢？求指教~

CD44有亚群，需要比较亮的颜色，所以选的PE，CD25本身分的比较开，所以用不太亮的PE-Cy7就可以了。

niwanmao

陈十七 发表于 2018-8-1 13:55
倪老师，在分选仪给出的荧光素中没有alexa fluor700也可以用吗？它是和apc-alexa700差不多的荧光吗？我查 ...

我们平时在APC-Alexa Fluor 700通道检测Alexa Fluor700效果挺好。

陈十七

robert1988 发表于 2018-8-2 03:33
CD44有亚群，需要比较亮的颜色，所以选的PE，CD25本身分的比较开，所以用不太亮的PE-Cy7就可以了。 ...

感谢老师指导，我们一直做c57小鼠脾脏的cd25也没有特别明显的分群。