淋巴细胞圈门

Swang51 · 发表于 2018-10-8 06:05:52

各位高手，我做肿瘤相关的研究。取小鼠肿瘤组织，外周血及脾细胞行流式检测。但CD4及CD8分群不好。不知道问题出在哪儿。谢谢

苏沁沁 · 发表于 2018-10-8 09:27:55

FITC和pc5.5之间有点补偿、这是调节之后图吗？小鼠标本是这样的、圈强阳性表达那一群就行

Swang51 · 发表于 2018-10-8 11:21:34

多谢！上次只取了脾细胞。分群很好。这次取了脾细胞，外周血细胞和从肿瘤组织中分离TIL。脾细胞和外周血细胞CD4和CD8看起来分三群。一个panel染了9种颜色。不知道是哪儿出了问题。肿瘤组织的TIL似乎只有CD8+细胞。确定没有漏加抗体。不确定是TIL就是如此表达还是哪儿出了问题。

niwanmao · 发表于 2018-10-8 15:08:01

Swang51 发表于 2018-10-8 11:21
多谢！上次只取了脾细胞。分群很好。这次取了脾细胞，外周血细胞和从肿瘤组织中分离TIL。脾细胞和外周血细 ...

能否将方案配色、检测的仪器配置写一下？

Swang51 · 发表于 2018-10-8 20:21:46

谢谢苏老师，倪老师。我的配色方案是aqua blue－live/dead，CD3/APC-cy7, CD4-FITC, CD8-percp, CXCR5-BV421,PD1-PE-Cy7,CTLA4-APC700,CD62L-APC,Ki67-PE.机器是BDFACS Aria IIu.
另外，倪老师，我刚加入了知识星球。

niwanmao · 发表于 2018-10-9 08:57:00

Swang51 发表于 2018-10-8 20:21
谢谢苏老师，倪老师。我的配色方案是aqua blue－live/dead，CD3/APC-cy7, CD4-FITC, CD8-percp, CXCR5-BV42 ...

好的，为避免重复，在知识星球继续讨论。

tiger · 发表于 2018-10-9 10:58:02

Swang51 发表于 2018-10-8 20:21
谢谢苏老师，倪老师。我的配色方案是aqua blue－live/dead，CD3/APC-cy7, CD4-FITC, CD8-percp, CXCR5-BV42 ...

我感觉做TIL，最好用CD45圈门。

Swang51 · 发表于 2018-10-10 05:49:23

是的。谢谢。下次我就染cd45.

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