全血血小板染色-感恩回答的老师

jqr946

各位老师们好，之前有提问过，按照老师们的建议，我把坐标轴用双对数展示出来，染色方案还是按照之前的（抗体：biolegend公司的Percp/Cy5.5-CD62P，BV510 CD41，FITC-CD42b，步骤：取全血100ul+2ul抗体（上述三种抗体各2ul）室温染色15min，2%多聚甲醛固定15min，裂红10分钟，两次洗涤后加200ulTyrode‘s buffer重悬上机检测）。现在的结果图是下面这样的，不知道这样对不对？
我有几个疑问想要请教一下：
1.我用cytoexpert软件分析的（因为实验室流式仪用的是cytoflex的流式软件），有一个自动圈门功能，我觉得很神奇为什么我在blank圈号的门它到染色群会自动改变，如图上显示，
2.圈门上，我发现染色和激动剂使用之后，不是规则的在一侧而是有一个变形的，想知道怎么样才能更好的圈门呢？

niwanmao

1、自动圈门我不知道CytoExpert的实际效果，无法判断，但这个简单的实验，我建议还是手工圈一下。

2、设门，可以用多边形门，如下：

tiger

用2UL全血，100UL反应体系，加一个CD61，用CD61圈定PLT。你用这个试试

jqr946

tiger 发表于 2018-10-9 11:24
用2UL全血，100UL反应体系，加一个CD61，用CD61圈定PLT。你用这个试试

想问下老师2ul的全血，抗体加多少呢？我目前100ul全血加2ul抗体，是不是按比例降下去。

jqr946

niwanmao 发表于 2018-10-8 15:55
1、自动圈门我不知道CytoExpert的实际效果，无法判断，但这个简单的实验，我建议还是手工圈一下。

2、设门 ...

好的，谢谢老师！