跪求胞内染色固定破膜后最佳离心速度

winteran

老师好，最近做流式发现，细胞固定破膜以后很难用活细胞的速度离心下来，我做淋巴细胞的，一般淋巴细胞我是1700rpm,离心5min。但是胞内染色的话，这个速度离不下来细胞，看不到明显的细胞沉淀，因为细胞已经破膜，会比较小。细胞损失很多。然后我又试了固定破膜之后后续所有的步骤都用8500g 3min，这样子细胞是都可以离心下来，没什么细胞损失，但是上流式却发现这样做，离心速度太大，造成了不少细胞粘连，感觉有少一半的细胞都不是单细胞状态了。请问这个问题怎么解决 呢？

niwanmao

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流式一般建议离心速度500g，大多数离心机是1500转/分。不存在你说的情况。

刘瑞金

我觉得可以试试1000g。不过我做的也是有时候黏连死亡多

刘瑞金

我平常1200g6min，都是瞎摸索的，有时候能做出较为典型的情况。