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[细胞周期] 请教,帮我看一下这个周期实验的问题

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发表于 2010-11-4 14:49:53 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
是一个同学拿来测的酵母菌细胞周期,PI染色
各位老师帮我看下问题出在哪里了
对照:
1.jpg
样品1:

样品1

样品1

样品2:

样品2

样品2

剧这位同学讲酵母菌细胞周期跟普通动物细胞应该是一样的
但是结果为什么会这样呢?

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发表于 2010-11-4 16:33:10 | 显示全部楼层
回复 兔子赵 的帖子


    其实你可以不断调整G1和G2 Marker的位置,最终使其能够正确拟合出真实的周期的。
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发表于 2010-11-4 19:03:37 | 显示全部楼层
回复 兔子赵 的帖子
细胞可能聚集太多或细胞浓度太大,PI染色不够充分

   
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 楼主| 发表于 2010-11-4 23:09:15 | 显示全部楼层
谢谢
样品1为什么会出现这样一个峰呢?S期比例非常大?
细胞浓度是5次方每毫升,染色20分钟以上了,应该染色没有问题吧?
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发表于 2010-11-5 07:59:24 | 显示全部楼层

我个人认为染色应该没有问题,之所以出现这种形态的峰,可能还是跟细胞状态关系更大一点。
至于这几个标本的分析,我觉得你的曲线拟合都不太好,需要不断调整G0、G2那两个Marker,直至拟合跟峰几乎一致。

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发表于 2010-11-5 17:20:57 | 显示全部楼层
对,我也认为是细胞状态的问题,即使对照标本的结果,%CV值很大(19.53%),超过8%结果已经不可以接受了。我想可能你养的细胞或者细胞传代时间太长,又或者细胞碎片和死细胞太多,又或者细胞处理过度变形等情况都会出现这样,出现这种峰根本是不能分析的,只有查找原因重新再检测。
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