1、请见DCFH-DA的配制：
DCFH-DA, 1 mg/ml
Dissolve DCFH-DA (2′,7′-dichlorofluorescin diacetate; mol. wt. 487; Molecular Probes) at 1 mg/ml in DMSO.
Store dry and protected from light up to six months at −80°C.
Dye should be stored in 50-l aliquots to avoid refreezing可见，DCFH-DA本来就是溶解在DMSO，所以DMSO应该不会影响活性氧的检测。
2、PMA是用来活化细胞的，使我们可以检测到细胞内的活性氧水平，同时我们需要使用不刺激的细胞作为本底对照。
3、NAC我没用过，应该是另外一种活化物，作用跟PMA应该差不多，只是可能使用在不同的细胞种类上。
老师好，请问Current Protocols in Cytometry一书中9.7.2 OXIDATIVE Metabolism 一章中说的加入PMA后立即将管上机检测保证一个真实零值详见“As soon as PMA has been added, run the tube on the flow cytometer to ensure a true zero value."是什么意思？而你说的PMA是用来活化细胞的，使我们可以检测到细胞内的活性氧水平，（是指的PMA加入可以增加可检测到的活性氧水平么？初次接触我不是很理解）我看到文献中讲NAC能抑制H2O2作用后HepG2细胞内ROS产生率，见文献N一乙酰半胱氨酸对内质网应激介导的HepG2细胞凋亡的作用。是不是PMA和NAC作用机理不同啊？我想用体外细胞做实验，您主要是用人中性白细胞做实验么？PMA主要针对人血细胞么？请指教谢谢！
发表于 2010-11-9 16:12:01
发表于 2010-11-9 20:53:55
）我看到文献中讲NAC能抑制H2O2作用后HepG2细胞内ROS产生率，见文献N一乙酰半胱氨酸对内质网应激介导的HepG2细胞凋亡的作用。是不是PMA和NAC作用机理不同啊？我想用体外细胞做实验，您主要是用人中性白细胞做实验么？PMA主要针对人血细胞么？请指教谢谢！