新手请教细胞凋亡结果分析

feiyangfq

新手请教双染结果分析问题，不清楚我们的结果是否正常，然后怎么去画十字门呢？
我的实验处理是一个PI组；一个AnnexinV组；一个药物处理双染组；一个不加药物的双染组；
下面依次是这四组处理的双染结果，请大神老师指点一下，
具体有以下几个问题：
1.这两个单染的结果是否可用；
2.如何画门才合理;
3.结果是否合理；

liuruiluna

感觉补偿没有调 所以分群还没分开

feiyangfq

liuruiluna 发表于 2019-1-29 13:41
感觉补偿没有调 所以分群还没分开

能否请教一下如何调补偿，我之前按照网上的教程调补偿一直没有成功，我放上去的图确实没有调补偿

feiyangfq

liuruiluna 发表于 2019-1-29 13:41
感觉补偿没有调 所以分群还没分开

我的单阳组结果是不是有问题啊

liuruiluna

可以把数据发上来看看

ghqiu09

先把前侧向的门圈出来，左下角为细胞碎片，然后再看荧光。

feiyangfq

liuruiluna 发表于 2019-1-29 17:30
可以把数据发上来看看

这是我的数据，文件中有对应的说明，麻烦您帮我看看，谢谢！

feiyangfq

ghqiu09 发表于 2019-1-29 21:26
先把前侧向的门圈出来，左下角为细胞碎片，然后再看荧光。

这个我也试过了，但是效果还是一样的

dengweibo1112

个人理解，FL3-FL1  6%,不知图形这样调合适不，欢迎指导,共同学习！

liuruiluna

我分别用FL2和FL3 看了  FL3显示得更好些，补偿和楼上差不多，但不同的样本，补偿要微调。否则有补偿不合适的情况。 从图来看，SSC的电压可以稍微低一些。FITC的群分的不太清楚，要么是FITC的电压需要提高一些看是否有改善，要么可能是细胞的自发荧光比较强，用FITC的信噪比不好，试试APC标记的AnnexinV 和7AAD 搭配来看一下，信噪比会好一些。FSC/SSC中有两群，原则上应该都看看，因为细胞凋亡后有一些细胞的状态已经改变，但它们也含有凋亡细胞
https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=MTY5NDF8ZGE1NzZhM2R8MTc0MDQ3NDQyM3wwfA%3D%3D