封闭血清选择

我想成大牛

站长，各位站友，最近需要做封闭，之前看了站内的关于同型对照的帖子，除了商品化的封闭剂能有效降低非特异性染色，血清也是很好的选择。
我现在需要对人源的细胞进行封闭，以降低一抗非特异性染色，一抗是鼠单抗，二抗是羊抗鼠IgG PE，那么，我的封闭血清应该怎么选择呢？是用human IgG还是mouse IgG? 类似这种选择的原则是什么？

niwanmao

我想成大牛 发表于 2019-2-11 15:16
接上，我描述的有点问题，我想问的是应该选择哪种IgG,不是血清。

直接买商品化的Fc block不是更好？
人IgG的话，可以买那种不分亚型，直接血清中提取的，例如：https://www.sigmaaldrich.com/cat ... ng=zh&region=CN
因为你检测的是人细胞，所以用人IgG封闭人细胞表面的Fc受体。

我想成大牛

接上，我描述的有点问题，我想问的是应该选择哪种IgG,不是血清。

我想成大牛

niwanmao 发表于 2019-2-11 18:24
直接买商品化的Fc block不是更好？
人IgG的话，可以买那种不分亚型，直接血清中提取的，例如：https://ww ...

我的用量很大，买商品化的试剂太贵了，所以退其次选择human IgG。谢谢站长的推荐。

我想成大牛

niwanmao 发表于 2019-2-11 15:09
直接买商品化的Fc block不是更好？
人IgG的话，可以买那种不分亚型，直接血清中提取的，例如：https://ww ...

倪老师，我看了Elimination of Erroneous Results in Flow Cytometry Caused by Antibody Binding to Fc Receptors on Human Monocytes and Macrophages这篇文章，在实验方法部分，是先封闭，不做清洗直接做染色？还是需要洗去封闭剂在做染色？还是封闭染色同时进行？文章里它是封闭后就染活死细胞试剂了，我有点搞不清。我用美天旎商品化的Human Fc block是同时进行的。请倪老师教教我。

niwanmao

我想成大牛 发表于 2019-2-12 17:00
倪老师，我看了Elimination of Erroneous Results in Flow Cytometry Caused by Antibody Binding to Fc  ...

可以洗，也可以不洗。