透膜后阴性对照显出两个峰是为什么？

kerrsun · 发表于 2019-2-19 15:13:40

各位老师同学，近日用全血做流式分析，阴性对照总是出现两个峰。因为裂红步骤中红细胞有些许残留，所以猜想是红细胞的问题，但今天在裂红后，透膜前上了机，没有出现阴性对照两个峰的情况。透膜之后再上机，两个峰又出现了。为什么会出现这种情况，求助…

niwanmao · 发表于 2019-2-19 15:30:28

不要用直方图，用散点图找问题

kerrsun · 发表于 2019-2-19 15:35:59

现在是这样的情况老师，有两群细胞，但大小和颗粒度叠在一起区分不开

kerrsun · 发表于 2019-2-19 16:21:11

染了多色，percp，FITC,PE三个通道里出现了双峰的情况，APC和APC/cy7两个通道就没有

robert1988 · 发表于 2019-2-20 01:35:01

kerrsun 发表于 2019-2-19 16:21
染了多色，percp，FITC,PE三个通道里出现了双峰的情况，APC和APC/cy7两个通道就没有 ...

autofluorescent一般都在蓝绿光激发的颜色里面，估计是autofluorescent。你用活性鉴定染料排除死细胞看下。

niwanmao · 发表于 2019-2-20 08:52:28

kerrsun 发表于 2019-2-19 15:35
现在是这样的情况老师，有两群细胞，但大小和颗粒度叠在一起区分不开

图片好糊啊。
这部分信号是非特异性的。

mybiosciences · 发表于 2019-6-26 11:16:37

做流式记得加死细胞染料，切记切记

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