用CD3包板刺激后CD3染不上

荷楼听雨 · 发表于 2019-3-1 16:51:12

求助各位大佬，我用了小鼠脾脏的细胞做的实验。在anti-CD3包被的24孔板中养了15h和72h，结果CD3和γδTCR都没染上，大家有没有遇到这种情况？只养3小时的话倒是都可以染上。

niwanmao · 发表于 2019-3-2 15:21:50

活化指标如何？

荷楼听雨 · 发表于 2019-3-12 12:37:05

niwanmao 发表于 2019-3-2 15:21
活化指标如何？

没染活化指标，但刺激3小时PD-L1表达明显上调了，应该是活化成功了，我把图放上来麻烦您看看。

荷楼听雨 · 发表于 2019-3-12 12:39:57

荷楼听雨 · 发表于 2019-3-12 12:44:39

已排除死细胞和黏连体了

tiger · 发表于 2019-3-12 15:11:18

荷楼听雨发表于 2019-3-12 12:39

都染上了，与3h相比，15和72h，CD3阳性率增加，但表达下调，gdTCR弱阳性，表达上调。

mybiosciences · 发表于 2019-3-13 00:15:26

换个不同克隆号的CD3试试

mandy · 发表于 2019-3-29 10:19:11

您好，请问您这个问题解决了吗？请问刺激用的CD3克隆号和流式抗体CD3的克隆号分别是什么？

qingshi · 发表于 2019-3-31 19:30:31

PD-L1表达上调？？？你测的是什么细胞上的pdl1?树突or单核？
另外活化T本来CD3下调，被你说成你说染不上哈哈

荷楼听雨 · 发表于 2019-4-1 22:59:21

qingshi 发表于 2019-3-31 19:30
PD-L1表达上调？？？你测的是什么细胞上的pdl1?树突or单核？
另外活化T本来CD3下调，被你说成你说染不上哈 ...

CD4+和CD8+的T细胞。就是感觉没有明显分群了，然后我怀疑是不是anti-CD3把表位占了，咨询了公司他们说应该不会。。。所以感觉很奇怪

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