单管10色方案（11抗体）做血常规是什么感受？

niwanmao

自动血液学分析仪可用于将白细胞（WBC）区分为成熟中性粒细胞（mNE）、淋巴细胞（LY）、单核细胞（MO）、嗜酸性粒细胞（EO）和嗜碱性粒细胞（BA）等。 然而，这些分析仪可能在识别异常细胞方面存在问题，包括原始细胞（BL）和未成熟粒细胞（IG）等。 在这种情况下，增加一些标记找出异常细胞并通知用户分类计数可能存在的不准确性很重要。

2018年8月份，我们在论坛上和公众号推送过5个5~10色的方案，极具参考意义：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6879-1-1.html

今天，再推送一个Ann Lab Med.2019年3月份刚发表的10色方案。

方案组成

抗体	表达该抗原的细胞	荧光素
CD5	T细胞，某些原始T细胞	PC5.5
CD13	单核、中性粒、嗜酸、嗜碱、未成熟粒、髓系原始细胞	PE
CD15	中性粒细胞、嗜酸粒细胞	PB
CD16	非经典型单核、中性粒细胞	APC700
CD19	B细胞，原始B细胞	APC
CD33	单核、中性粒、嗜酸、嗜碱、未成熟粒、髓系原始细胞	PE
CD34	原始细胞、造血干细胞	ECD
CD36	单核细胞、红细胞、血小板	FITC
CD45	白细胞	APC750
CD138	浆细胞	OC515
CD203c	嗜碱粒细胞	PC7

上述荧光素供参考，你可以根据自己的仪器配置进行相应调整。

设门

在介绍设门前，我个人对文章中的部分矩形门（例如B门和C门）不是很赞同，更倾向于多边形，可以更精确地圈出需要的细胞。

A、圈出所有有核细胞（WN）：

B、圈出B门（原始细胞、嗜碱粒细胞、少量中性粒细胞）和C门（B细胞、T细胞、NK细胞、一些原始B细胞）：

C、除去上面的B和C门，剩余的细胞显示在CD36/FSC图上，可分出单核细胞和非单核细胞（主要是粒细胞）：

D：粒细胞再通过CD15/CD16散点图分出CD16++的成熟中性粒细胞和CD16-的粒细胞，后者再通过图K和图L分出CD45弱的未成熟粒细胞和CD45高的嗜酸粒细胞：

E：这个图的上级是B门，主要是从中圈出一些掉到原始区域的中性粒细胞（CD15+CD203c-）：

F：上级门应是C门，利用CD5/CD19散点图，分出B细胞（CD19单阳性）和T细胞（CD5单阳性）、CD5+CD19+的B1细胞：

G：F图里面的CD5-CD19-细胞群，在CD36/CD16散点图上，进一步分出NK（CD16+CD36-），剩余的CD36+部分为单核，此时需跟C图的单核细胞计算在一起：

H：该图文章中没有具体说明，看表达应是CLL患者的外周血结果，见CD19+CD5+细胞显著增多：

I图与C图一样，J图显示C门内的单核：

K和L前面在D图那里说了，进一步确认嗜酸和未成熟粒，K图应为正常，L图应是未成熟粒细胞增多：

M图，和B图一样的显示方式，样本为慢性粒细胞白血病患者，可看出和正常人明显的不同之处，N图和O图分别显示其嗜碱粒细胞群：

P、Q、R、S、T、U显示白血病患者的原始细胞（蓝色细胞群。S图为原始髓系细胞群，T图为原始B细胞群。U图为髓系标记阳性的原始B细胞。

V、W、X、Y显示的是骨髓瘤患者的外周血，看到明显的CD45-、CD19-的浆细胞：

可见这管方案在监测急性白血病、CLL和MM患者的外周血细胞效果不错。

另外，作者还将该方案结果与手工计数对比，相关系统基本上在0.9以上。不过作者也承认，没有与自动血液学分析仪进行对比，这是个遗憾。

参考文献：Park D, Chang J, Kahng J, et al. Development of a Novel Flow Cytometry-Based System for White Blood Cell Differential Counts: 10-color LeukoDiff. Ann Lab Med. 2019 Mar;39(2):141-149. doi: 10.3343/alm.2019.39.2.141.