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自从20世纪中期发明以来,常规的光学流式已经遍地开花,成为细胞学分析的金标准,除了生物学、医学领域外,还广泛用于畜牧、养殖、物理、水治理等等领域。
但是,再强大的东西都是有缺点的,目前光学流式的缺点主要是荧光信号容易受到背景干扰、相邻通道的荧光素干扰、荧光素稳定性等等,因此现在都在寻求光学流式细胞术的替代技术。 磁学流式细胞术(MFC),是将常规流式细胞术的荧光染料和光电探测器分别用磁性粒子和磁场传感器取代,是一种很有前景的新兴方法。 下图为MFC的原理模式图,磁标记的颗粒或细胞在微液流芯片上通过磁场传感器,在b图的不同状态,可产生不同的信号,最后便形成c图的波形:
与常规光学流式的性能对比,可总结为如下表:
| 光学流式(OFC) | 磁学流式(MFC) | 备注 | 仪器复杂度和成本 | - | ++ | OFC:成本高、光路复杂;MFC:相对成本便宜(主要是薄膜芯片和塑料,半导体) | 大小/便携性 | - | ++ | OFC:较大,大多桌面式;MFC:小巧,便于携带 | 是否需样本制备 | - | +++ | OFC:需要详细的样本制备方案;MFC:除了磁性标记外,无需其它样本制备步骤} | 是否需操作者经验 | - | ++ | OFC:需要训练;MFC:设备制造时就可集成许多功能,降低操作难度 | 可检测参数 | +++ | - | OFC:多达30个参数,甚至更多;MFC:目前只能单参数 | 定量能力 | +++ | +++ | OFC:很容易获得数据;MFC:能以cm/s的速度计数样本 | 灵敏度 | +++ | +++ | OFC:取决于荧光素、实验设计和仪器;MFC:取决于磁感应器、磁标记、实验设计和仪器 | 通量 | - | ++ | OFC:一次只能分析一个样本;MFC:可同时在微液流芯片上分析多个样本,目前至多6个 |
注:+号越多,说明优势越明显。
整体看下来,磁学流式优势明显,唯一不足的是检测参数上,目前无法多参数检测,但通过优化设计方法,未必不能实现多参数检测呢?当初荧光流式一开始也是只能单色检测的。
所以,Go with flow吧,国产流式厂家,很多人都嫌弃你们性能的时候,你们为什么不思考一下弯道超车呢? 有兴趣的朋友可参考2019年2月份刚出来的这篇综述:Soares R, Martins VC, Macedo R, Cardoso FA, Martins SAM, Caetano DM, Fonseca PH, Silvério V, Cardoso S, Freitas PP. Go with the flow: advances and trends in magnetic flow cytometry. Anal Bioanal Chem. 2019 Feb 19. doi: 10.1007/s00216-019-01593-9.
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