用流式监测手卫生，又快又准确

niwanmao

在医疗行业，医生、护士用他们的双手来治疗患者，但同时也可能使得这双手在不同患者之间传播微生物，有可能导致感染的发生。皮肤上的细菌菌群分为瞬时菌群（位于皮肤表浅部位）和驻留菌群（更深层的皮肤）。常见的皮肤微生物群落在皮肤裂缝、汗腺、毛囊和指甲下面，而瞬时微生物不会留在皮肤上，而是通过触摸定植。瞬态菌群通常与医疗机构中的感染传播有关，并且很容易从医生传染给患者，从患者传播到医生，或者根据世界卫生组织（WHO）从环境中的无生命物体中获取。
为了更好地了解这种风险，监测残留在手上的细菌量对于评估卫生很重要的，这对医疗活动中人类健康有着直接影响。

目前有多种分子和微生物方法用于手上细菌的检测、定量和鉴定，每种方法都有各自的优点和缺点，最常用的还是琼脂平板手指印迹法、环境拭子、手拭子和手部冲洗液等方法收集的样品进行细菌培养。但这种方法时间长，灵敏度欠佳。

为此，南非Singh A等人用150毫升无菌PBS冲洗80位参与者（40名医疗机构学生、40名患者）的双手，洗下皮肤表面的任何可能的微生物，用SYBR Green I染色，以流式细胞术定量分析样品的活/死/总细菌群。这些研究结果发表在3月9日的Cytometry B Clin Cytom上。

分析很简单，就是利用空白对照圈出细菌区（下图左侧红框），排除掉框外的非细菌微生物、非有机的颗粒、游离DNA等信号，接着用FL1的直方图进一步分出核酸含量高的HNA和含量低的LNA细菌，HNA细菌被认为是更活跃的，而LNA细菌被认为不活跃的，但是在某些条件下可以快速转变为活跃性的致病菌：


以下是流式法与其它几种方法的结果对比，Total和Live为流式法检测结果，Fastidious是绵羊血琼脂培养的生长条件苛刻的微生物、Heterotrophs和Total Coliforms则是IDEXX方法检测所得，很明显，流式法检测得到的结果更高更稳定：


在Live群体中，流式进一步将其分为HNA和LNA，可见手上的细菌大多为LNA细菌：


因此，用流式监测手卫生，又快又迅速，成本也低。

参考文献：
Singh A, Yelverton CJ, Barnard TG. Rapid Quantification of the Total Viable Bacterial Population on Human Hands Using Flow Cytometry with SYBR® Green I. Cytometry B Clin Cytom. 2019 Mar 9. doi: 10.1002/cyto.b.21776.