细胞保存液是否有用？

特勒兮兮

这是加细胞保存液和不加细胞保存液流式图的区别，我咋觉得不加的状态更好呢，血已经放了4天了，4℃，麻烦倪老师解答一下啊。

niwanmao

保存液重点是保存抗原表达量和细胞比例，你可以对比一下排除碎片后的细胞比例、抗原表达率。
FSC和SSC的改变，是任何保存液都无法避免的小问题，4天时间太短，延长到2周～3周，你就可以体会到明显的差异。

tiger

niwanmao 发表于 2019-3-13 14:12
保存液重点是保存抗原表达量和细胞比例，你可以对比一下排除碎片后的细胞比例、抗原表达率。
FSC和SSC的改 ...

请教倪老师，要保存肿瘤组织块，需要远途运输。这个保存液可以吗？具体怎么处理?谢谢

niwanmao

tiger 发表于 2020-12-31 16:29
请教倪老师，要保存肿瘤组织块，需要远途运输。这个保存液可以吗？具体怎么处理?谢谢 ...

肿瘤组织的话，尽量制备成单细胞悬液后，再加入保存液，这样会更好一些。

tiger

niwanmao 发表于 2020-12-31 22:19
肿瘤组织的话，尽量制备成单细胞悬液后，再加入保存液，这样会更好一些。 ...

谢谢倪老师。我试一试吧，看看多大的组织块在这保存液里可保存完好。

niwanmao

tiger 发表于 2021-1-4 08:55
谢谢倪老师。我试一试吧，看看多大的组织块在这保存液里可保存完好。

我们自己这边一般是2mm大小的组织用魔滤+魔杵处理成单细胞悬液，然后按照样本:保存液=7:1的比例，加入保存液保存。

tiger

niwanmao 发表于 2021-1-4 09:07
我们自己这边一般是2mm大小的组织用魔滤+魔杵处理成单细胞悬液，然后按照样本:保存液=1:7的比例，加入保 ...

谢谢倪老师

niwanmao

tiger 发表于 2021-1-4 10:00
谢谢倪老师

不好意思，刚才比例写反了，应该是样本7份，保存液1份。

Reyna

niwanmao 发表于 2021-1-4 09:07
我们自己这边一般是2mm大小的组织用魔滤+魔杵处理成单细胞悬液，然后按照样本:保存液=7:1的比例，加入保存 ...

请问倪老师，加入保存液后是可以先把肿瘤组织单细胞悬液放着后续再染色么，和固定有什么区别呢（固定会影响抗原抗体结合，我都是固定前就染色了的）？因为我的样本量很大，一天做到染色耗时太长了，我可以第一天加细胞保存液，第二天染色，第三天上机么？

niwanmao

Reyna 发表于 2021-1-5 21:46
请问倪老师，加入保存液后是可以先把肿瘤组织单细胞悬液放着后续再染色么，和固定有什么区别呢（固定会影 ...

多聚甲醛固定，对抗原表达强度影响大，甚至某些标记可能会测不到。
我们这个流式专用的保存液，作用机理不同，不会影响FSC和各抗原表达。
你这个要做的话，可以第一天把组织解离成单细胞悬液，然后加入1/7~1/8体积的保存液，保存在4度。然后后续按时间安排，在2周内，随时拿几个出来做即可。