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[图片] 大体积裂解法,获取大量白细胞,做稀有细胞研究

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发表于 2019-5-16 15:58:27 | 显示全部楼层 |阅读模式

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平时,我们进行流式细胞染色时,通常都是100ul的体积,但是有时候,我们需要大量细胞的时候,即使浓缩了血样,仍然无法达到需要的细胞量,怎么办?

可以尝试先把红细胞裂解掉,那么如何裂解最好?EuroFlow推荐了一个BulkLysis法(即大体积裂解法),便于大家获取充足量的白细胞(100ul可达到10E7细胞量),主要用于需大量细胞的微小残留病检测,也适用于其它检测稀有细胞的实验。

视频请访问:https://v.qq.com/txp/iframe/player.html?vid=g0871ho8sk0
请注意观看细节,氯化铵裂解液的配方,论坛上有。

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 楼主| 发表于 2024-1-9 17:05:50 | 显示全部楼层
mikemaosi4396 发表于 2024-1-9 16:07
对的,没有加任何抗体,那我可以加个死活染料排除死细胞,看是否是这个因素的影响 ...

不一定可以,有时候跟染料粘连也会有关,分析时直接排除即可
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2024-1-9 13:09:26 | 显示全部楼层
倪老师,我使用氯化铵裂解液大体积裂解,单核细胞群在FITC的通道上有一群阳性信号,这是什么情况
大体积裂解.png
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 楼主| 发表于 2024-1-9 15:38:15 | 显示全部楼层
mikemaosi4396 发表于 2024-1-9 13:09
倪老师,我使用氯化铵裂解液大体积裂解,单核细胞群在FITC的通道上有一群阳性信号,这是什么情况 ...

意思是FITC没有加任何抗体,却出现了一个小群,是吧?这样的话,还是得考虑非特异性的荧光,可能是跟死细胞相关。
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发表于 2024-1-9 16:07:20 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-1-9 15:38
意思是FITC没有加任何抗体,却出现了一个小群,是吧?这样的话,还是得考虑非特异性的荧光,可能是跟死细 ...

对的,没有加任何抗体,那我可以加个死活染料排除死细胞,看是否是这个因素的影响
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发表于 2024-1-9 17:28:12 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-1-9 17:05
不一定可以,有时候跟染料粘连也会有关,分析时直接排除即可

刚才尝试了取出细胞粘连,这群非特异性荧光的信号基本无了,感谢!
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