CFSE标记的T细胞的设门问题

cellprobe

请问，CFSE标记的T细胞和MDSC共培养三天，检测没有增殖的T细胞的比例。
请问这个图有三个峰，哪种设门是对的？谢谢。

niwanmao

以刚标记好CFSE未进行共培养的父代淋巴细胞做为参考。
如果父代在最右侧，那么就按第二个图圈。

cellprobe

niwanmao 发表于 2019-5-26 19:54
以刚标记好CFSE未进行共培养的父代淋巴细胞做为参考。
如果父代在最右侧，那么就按第二个图圈。 ...

刚标记好CFSE的T细胞，也只有一部分T细胞被标记上CFSE，是两个峰。

niwanmao

cellprobe 发表于 2019-5-26 22:47
刚标记好CFSE的T细胞，也只有一部分T细胞被标记上CFSE，是两个峰。

那么是标记有问题。图看一下。

cellprobe

niwanmao 发表于 2019-5-27 07:59
那么是标记有问题。图看一下。

这是我们用biolegend 5uM CFSE刚标记好的T细胞，每次都是有两个峰。

niwanmao

cellprobe 发表于 2019-5-27 09:21
这是我们用biolegend 5uM CFSE刚标记好的T细胞，每次都是有两个峰。

这说明还有阴性细胞、也就是没染上的细胞

cellprobe

niwanmao 发表于 2019-5-27 13:47
这说明还有阴性细胞、也就是没染上的细胞

CFSE染色的效率能达到100%吗？

白衣小云

楼主，你好，请问你的MDSC是流式机分选的么？

cellprobe

白衣小云 发表于 2019-5-28 21:05
楼主，你好，请问你的MDSC是流式机分选的么？

磁珠分选的，美天旎的磁珠

苟乃乃

niwanmao 发表于 2019-5-27 13:47
这说明还有阴性细胞、也就是没染上的细胞

老师，您好，我想请问下，姑且算该同学CFSE标记的成功率为75.8%，那么是不是后面增殖分析的时候结果还是很受影响？