T细胞CD3/4/8的流式问题

xiaofeia · 发表于 2019-6-11 17:48:08

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左边是D0的流式图，右边是D8的，D0的时候在CD3分开了（理论上CD3应该是很容易分开的），可是D8的时候CD3是没有分开的，在P3的门往左拖动的时候会发现CD4/CD8双阴细胞会增加，所以感觉是CD3阳性和阴性没有分开，而且D0（左图）的时候最后一个图的双阴比例太高了感觉，所以是什么原因导致？是三种抗体的浓度都不够吗，抗体比例是1比100，细胞量大概在5*10的5。求大神回答 T T .

niwanmao · 发表于 2019-6-12 10:31:50

D8的时候，似乎FSC和所有的抗体荧光强度都变化很明显。你这个实验用的刺激因子是什么？

tiger · 发表于 2019-6-12 14:55:06

本帖最后由 tiger 于 2019-6-12 14:56 编辑

D8时CD3不是没有分开，而是所有细胞都表达CD3，你可以把DRAQ7图的门再重新圈一下，只圈阴性部分，可能更明显。

xiaofeia · 发表于 2019-6-13 09:06:46

niwanmao 发表于 2019-6-12 10:31
D8的时候，似乎FSC和所有的抗体荧光强度都变化很明显。你这个实验用的刺激因子是什么？ ...

50ng/mL的CD3单抗

xiaofeia · 发表于 2019-6-13 09:09:11

tiger 发表于 2019-6-12 14:55
D8时CD3不是没有分开，而是所有细胞都表达CD3，你可以把DRAQ7图的门再重新圈一下，只圈阴性部分，可能更明 ...

只所以觉得并不是全部都是CD3，是因为把门往左边拉的时候会发现CD4/CD8双阴比例会增加，理论上双阴的也没那么高

xiaofeia · 发表于 2019-6-13 09:13:01

tiger 发表于 2019-6-12 14:55
D8时CD3不是没有分开，而是所有细胞都表达CD3，你可以把DRAQ7图的门再重新圈一下，只圈阴性部分，可能更明 ...

DRAQ7的圈之前也试过了，基本没变，在DRAQ7中圈多的在FSC和SSC的时候分出来了

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[淋巴细胞亚群] T细胞CD3/4/8的流式问题

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