关于流式保存液与染死活的氨基酸染料

飞鸿317

买了流式中文网的流式保存液，用保存液保存的细胞就不能再用7AAD这种来染死活了。
那我能不能先用染死活的氨基酸染料染个死活，再用流式保存液保存，后面再染表面marker，上机检测？

niwanmao

是的，保存液因为有缓释的轻微固定作用，所以不能用核酸类死活染料。
另外一类死活染料，不叫氨基酸染料，而是胺类反应性染料，这类染料染好之后，再固定破膜是可以，但是长期保存，会存在荧光衰减的问题。

我们平时使用的体会是，由于新鲜采集的样本，几乎不会有细胞死亡，所以此时加入保存液，由于缓释的固定作用，细胞都是一致性处于同一状态，因此不需要区分死活。当然，即使经过这种特殊固定，少数细胞也会崩解，那时候“死”掉的细胞，都是直接成碎片的，在FSC/SSC是很容易区分开的，不像未经保存液处理的样本是逐步皱缩死亡导致分群不清。