外周血NK细胞胞内钙离子检测

malizewski

检测外周血NK细胞胞内钙离子，用Fura red和Fluo4作为钙离子荧光染料（PerCP-Cy5.5和FITC通道检测），还需要标记NK，已有APC-CD56，但是似乎有说APC的荧光信号对Fura red影响比较大？准备检测CD3和CD56，需要选择什么样的荧光染料呢？（BD celesta）

niwanmao

malizewski 发表于 2019-6-19 13:15
谢谢倪老师。我现在用的APC和PerCP-Cy5.5，发射波长相近（695，660），这个影响大吗？需要换吗？ ...

我认为不影响，看实际情况，因为不同厂家机器光路设计水平也不同。

niwanmao

如果担心干扰，是否可选择紫光激发的荧光素？

malizewski

谢谢倪老师。我现在用的APC和PerCP-Cy5.5，发射波长相近（695，660），这个影响大吗？需要换吗？

malizewski

niwanmao 发表于 2019-6-18 14:10
如果担心干扰，是否可选择紫光激发的荧光素？

谢谢倪老师。我现在用的APC和PerCP-Cy5.5，发射波长相近（695，660），这个影响大吗？需要换吗？

malizewski

倪老师，做外周血NK细胞胞内钙离子检测，用的Fura red 和Fluo 4两种染料，需要把NK分选出来再染色吗？我直接分PBMC，染Fura red和Fluo4，然后加CD56和CD3抗体，直接测NK细胞胞内钙，这样可以吗？

niwanmao

malizewski 发表于 2019-10-14 18:51
倪老师，做外周血NK细胞胞内钙离子检测，用的Fura red 和Fluo 4两种染料，需要把NK分选出来再染色吗？我直 ...

可以。