凋亡Q3和Q4区高度不一致

chinals90 · 发表于 2019-6-25 11:34:23

各位老师好！
我最近做凋亡的时候出现Q2和Q4高度不一致，导致7-aad的直方图出现三个峰,使用的是癌症细胞系，问题出在哪里?谢谢各位老师

Q2和Q4高度不一致

h951595223 · 发表于 2019-6-25 11:34:24

正常，PE和7-AAD都是红色荧光，早期凋亡染上了PE,部分PE的荧光会进入7-AAD的通道，细胞群自然会高一点，建议你用Annexin-v-APC/7-AAD就不会有这种问题

chinals90 · 发表于 2019-6-25 13:12:39

h951595223 发表于 2019-6-25 12:00
正常，PE和7-AAD都是红色荧光，早期凋亡染上了PE,部分PE的荧光会进入7-AAD的通道，细胞群自然会高一点，建 ...

谢谢解答，那我能否通过调节补偿来消除三峰，使q2和q4达到一个高度?

niwanmao · 发表于 2019-6-25 14:14:05

散点图这样分已经可以了啊，为什么要用直方图？

chinals90 · 发表于 2019-6-25 14:44:11

niwanmao 发表于 2019-6-25 14:14
散点图这样分已经可以了啊，为什么要用直方图？

小老板希望annexin v和7-aad的阳性数据各自成一张图

mybiosciences · 发表于 2019-6-26 10:09:14

是否做了单染补偿？
一个原因可能是补偿问题
另一个原因就是会有部分细胞核酸染料浅染

chinals90 · 发表于 2019-6-26 10:49:22

niwanmao 发表于 2019-6-25 14:14
散点图这样分已经可以了啊，为什么要用直方图？

http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1685-1-1.html
我在网上看到一个不错的资料，可惜连接已经失效，老师那里是否有留存?

niwanmao · 发表于 2019-6-27 08:18:43

chinals90 发表于 2019-6-26 10:49
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1685-1-1.html
我在网上看到一个不错的资料，可惜连接已经失效，老师 ...

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