不同种属的补偿可以混用吗，补偿微球的电压不适用细胞ze...

jqr946

各位老师们好，最近做了一个十色panel染人的淋巴细胞亚群，然后要上机前发现在自己没有买补偿的抗体，因为有的marker表达比较低，所以需要买相对应染料的高表达marker，但是由于没有现货，要等4-5周，当时想说要不就用鼠的对应染料来调补偿（因为我们实验室鼠的流抗比较多），但是回头一想，鼠和人细胞大小差别应该不小，补偿不是建立在电压上的嘛，就想说这次调好了可能也不一定能适用，所以就没做了。后来试剂商建议用补偿微球，本来都准备买补偿微球了，突然想到补偿微球不也长得很小吗，那到时候样本换成人的不就又不能适用了。求各位老师指导一下我这个补偿应该用什么方案最好呢？

qzuser3

荧光补偿和微球大小没有关系 荧光通道电压和微球大小也没有关系  可以用微球  当然 微球补偿也不是万能的

紫景风麟315

可以染什么就用什么maker调补偿，多跑一些样品，会有信号的，如果实在信号太弱，可以用微球代替

jqr946

紫景风麟315 发表于 2019-7-18 13:49
可以染什么就用什么maker调补偿，多跑一些样品，会有信号的，如果实在信号太弱，可以用微球代替 ...

那我可以用鼠的同样的染料来调补偿吗，就比如percp/cy5.5我原来要测的marker很弱，就用鼠的CD4的percp/cy5.5来调吗

jqr946

qzuser3 发表于 2019-7-18 13:26
荧光补偿和微球大小没有关系 荧光通道电压和微球大小也没有关系  可以用微球  当然 微球补偿也不是万能的 ...

那是不是不建议用不同种属的？如果微球大小和电压没有关系的话，是不是种属也没有影响呢？

niwanmao

jqr946 发表于 2019-7-18 14:07
那是不是不建议用不同种属的？如果微球大小和电压没有关系的话，是不是种属也没有影响呢？ ...

你可以试试，微球调节出的补偿，其实最后到真实细胞上，还是需要微调的。尤其是串联染料更加差异大。