这样画十字门合适吗？似乎细胞分群不是很好？

viola-lf · 发表于 2019-8-3 16:31:42

凋亡数据处理

经BD流式仪测定凋亡实验数据后，用flowjo软件分析结果，先根据三个校正组（图1 未染组，图2 FITC单染组，图3 PI单染组）确定十字门位置，但如果这样画门，后面实验组细胞分群似乎结果不佳，因为图4-7均为药物浓度梯度处理结果显示早期凋亡细胞数非常少。现在疑惑是我十字门没画好，还是实验结果就是这样呢？求大神们帮忙解疑！谢谢

hwthwt · 发表于 2019-8-3 19:19:10

首先根据第二张图很明显可以看出你的补偿没有调好。
其次在FSC/SSC圈细胞时应把除碎片之外的所有细胞都圈上

niwanmao · 发表于 2019-8-4 10:17:34

如@hwthwt 站友所说，PerCP－FITC的补偿加大

viola-lf · 发表于 2019-8-4 18:34:50

hwthwt 发表于 2019-8-3 19:19
首先根据第二张图很明显可以看出你的补偿没有调好。
其次在FSC/SSC圈细胞时应把除碎片之外的所有细胞都圈上 ...

谢谢！！！我试试

viola-lf · 发表于 2019-8-4 18:35:11

niwanmao 发表于 2019-8-4 10:17
如@hwthwt 站友所说，PerCP－FITC的补偿加大

谢谢倪老师！！！

viola-lf · 发表于 2019-8-5 10:05:36

hwthwt 发表于 2019-8-3 19:19
首先根据第二张图很明显可以看出你的补偿没有调好。
其次在FSC/SSC圈细胞时应把除碎片之外的所有细胞都圈上 ...

你好，想再次向你学习下，我不是很会调补偿，不知道大概调多少合适，自己调怎么都调不好

hwthwt · 发表于 2019-8-6 07:13:58

viola-lf 发表于 2019-8-5 10:05
你好，想再次向你学习下，我不是很会调补偿，不知道大概调多少合适，自己调怎么都调不好 ...

倪老师不是已经说的很清楚了么。你需要加大PerCP通道减去FITC通道的补偿值，把FITC单染管的阳性群体拉到跟阴性群体平行，重心致就算是补偿调到位了

viola-lf · 发表于 2019-8-6 10:01:45

hwthwt 发表于 2019-8-6 07:13
倪老师不是已经说的很清楚了么。你需要加大PerCP通道减去FITC通道的补偿值，把FITC单染管的阳性群体拉到 ...

好的，非常感谢！

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