抗体孵育好以PBS洗涤离心后为何得不到细胞？

ghost2r · 发表于 2011-1-7 08:18:34

各位老师：
如题，我用2*107个细胞/ml的单细胞悬液50ul与抗体及PBS共100ul孵育30min后，以2000rpm离心5分钟，为何离心管上完全看不出细胞来？
是哪里出了问题？求分析！是离心速度和时间不够吗？

我要检测的是T淋巴细胞

niwanmao · 发表于 2011-1-7 08:18:35

如果50ul的话，应该有1×10⁶个细胞，从管底看应该有比较明显的小团细胞。你有没有上机取一下试试？有时候肉眼不一定看的出。

ghost2r · 发表于 2011-1-7 08:58:53

我就是这个速度离心的话少数几支管能看到小的细胞团块，但多数离心管是比较清澈的。。。我今天去上一下流式看看情况再回来向您汇报~~可是我问过大多数人都说洗涤离心后应该是看得到明显的细胞团块的。。。

niwanmao · 发表于 2011-1-7 10:38:48

我就是这个速度离心的话少数几支管能看到小的细胞团块，但多数离心管是比较清澈的。。。我今天去上一下流式 ...
ghost2r 发表于 2011-1-7 08:58

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以流式获取时的细胞量为准，肉眼会欺骗你的，也或许你计数时出错了呢：）。

ghost2r · 发表于 2011-1-9 22:48:21

恩，去上了流式，细胞还是有的但不多。于是周五我加了100ul的细胞悬液和抗体一起孵育，然后仍然这个速度离心就能看得见细胞团块了。谢谢倪老师！！！！！！

chy · 发表于 2011-2-25 20:58:11

很多时候,肉眼看看不是很明显的情况下，上机子一取，会发现细胞还是满多的。如果肉眼能看到，那上机，肯定很多的。

一成天 · 发表于 2011-3-20 00:22:18

[quote]很多时候,肉眼看看不是很明显的情况下，上机子一取，会发现细胞还是满多的。如果肉眼能看到，那上机，肯定 ...

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