电压和补偿的相关性

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FITC和PE双染，FITC通道电压不变的情况下，PE通道电压增大，PE-FITC的补偿是会变高吗？同理，在保持PE通道电压不变的情况下，FITC通道电压增大，PE-FITC的补偿是会减小？
Ps： 之所以会问这个问题，是在流式中经常用到非荧光素类荧光，实际荧光强度很强且难以调节，电压和补偿（经常达到百分之几百）让人头疼。

niwanmao

先把电压优化好，再调节补偿。调节补偿过程中，电压千万不要随意乱动。
电压的优化，站内之前发过：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5478-1-1.html

wmj123456

niwanmao 发表于 2019-9-20 13:07
先把电压优化好，再调节补偿。调节补偿过程中，电压千万不要随意乱动。
电压的优化，站内之前发过：http:// ...

倪老师，在实际的实验中，我通常是先用空白管和样本管看下电压是否合适，主要关注阴性群出来在103左右，阳性群不会太超过105.然后就以这个电压调节补偿。
但是有时候，会遇到两个荧光通道的补偿很大的情况，即A通道向B通道遗漏的信号很多，细胞几乎是一条斜线的情况，那如果要再更改电压，是增大A电压，降低B电压？这个没有太理解为什么这样做。

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-11-2 17:31
倪老师，在实际的实验中，我通常是先用空白管和样本管看下电压是否合适，主要关注阴性群出来在103左右， ...

其实荧光渗漏本身是不受到电压影响的，我们印象中增大A电压使得B-A的补偿值小一点，这是一种算法上的错觉，但确实会使得补偿容易调一点

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-11-3 07:28
其实荧光渗漏本身是不受到电压影响的，我们印象中增大A电压使得B-A的补偿值小一点，这是一种算法上的错觉 ...

倪老师，那如果是增大了A电压，仪器上补偿矩阵里的补偿的数值是会减小的吧，但是电压大小和补偿的数值没有关系，我总感觉不太理解了。。。。这里面的补偿的数值是一个概念吗？这里面提到电压的大小只会改变补偿的数值，是不是又矛盾了啊。那既然电压改变不了补偿，又为什么每次补偿调节后，就不要再动电压了？一旦动电压，就要再动补偿了？

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-11-5 23:00
倪老师，那如果是增大了A电压，仪器上补偿矩阵里的补偿的数值是会减小的吧，但是电压大小和补偿的数值没 ...

compensation≠spillover
这是我表达的意思，也是你这个截图里面表达的意思

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-11-6 08:11
compensation≠spillover
这是我表达的意思，也是你这个截图里面表达的意思

倪老师，明白了，谢谢

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-11-3 07:28
其实荧光渗漏本身是不受到电压影响的，我们印象中增大A电压使得B-A的补偿值小一点，这是一种算法上的错觉 ...

倪老师，我发现调节电压的时候，如果两个通道的电压数值差异很大，也会导致荧光补偿数值很大，所以这俩通道的电压数值要尽可能接近，请问是为啥呀？

niwanmao

wmj123456 发表于 2024-7-17 15:41
倪老师，我发现调节电压的时候，如果两个通道的电压数值差异很大，也会导致荧光补偿数值很大，所以这俩通 ...

可能跟你在用的仪器有关吧，应该不是这个规律

wmj123456

niwanmao 发表于 2024-7-17 15:55
可能跟你在用的仪器有关吧，应该不是这个规律

我可能少说了一句，譬如两个荧光通道本身补偿比较大的情况下，这俩通道的电压数值不要差异那么大。。。。