CAR-T检测B细胞比例相关问题

www · 发表于 2019-10-9 09:25:58

本帖最后由 www 于 2019-10-9 09:28 编辑

求助：近期检测CAR-T中的B细胞比例，采用CD3/CD19进行染色，总会出现如下情况，CD19+在CD3+之上，有点感觉CD3+CD19+细胞群，又没有同时表达CD3和CD19细胞群，会不会是B细胞与T细胞binding或者其他问题呢？

112358answer · 发表于 2019-10-9 09:41:14

试着分析下粘连体？另外补偿调节有问题吗？

www · 发表于 2019-10-9 14:41:59

112358answer 发表于 2019-10-9 09:41
试着分析下粘连体？另外补偿调节有问题吗？

已经去过黏连体了。补偿没有问题，其他的表型，相同荧光下都是正常的位置，每次都只有CD19偏向CD3。

niwanmao · 发表于 2019-10-9 15:03:17

两幅图是两个样本？

www · 发表于 2019-10-9 16:07:38

niwanmao 发表于 2019-10-9 15:03
两幅图是两个样本？

是的，倪老师。不同的CAR-T样品，经过几次试验，都是同样的现象出现。

niwanmao · 发表于 2019-10-10 07:54:22

www 发表于 2019-10-9 16:07
是的，倪老师。不同的CAR-T样品，经过几次试验，都是同样的现象出现。

图1还正常的，只是整体右移，倒是图2，我觉得可能是非特异性增高。
你的染色方案一共哪几个荧光素抗体？补偿有没有影响？

www · 发表于 2019-10-10 08:49:54

niwanmao 发表于 2019-10-10 07:54
图1还正常的，只是整体右移，倒是图2，我觉得可能是非特异性增高。
你的染色方案一共哪几个荧光素抗体？ ...

这个方案只包括FITC和PE，就染了CD3和CD19而已。另外也采用BV421和APC-Cy7染CD3和CD19也是同样的偏移情况。同时以一样的补偿应用至CD4-FITC和CD8-PE是正常，是没有这种情况的。

木棉 · 发表于 2019-10-10 08:57:16

细胞群有倾斜，建议FITC-PE补偿看看

niwanmao · 发表于 2019-10-10 08:58:51

www 发表于 2019-10-10 08:49
这个方案只包括FITC和PE，就染了CD3和CD19而已。另外也采用BV421和APC-Cy7染CD3和CD19也是同样的偏移情况 ...

流式细胞仪是什么机型？

www · 发表于 2019-10-10 09:26:40

木棉发表于 2019-10-10 08:57
细胞群有倾斜，建议FITC-PE补偿看看

已经补偿了的结果

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