从人外周血分离中性粒细胞后，跑流式后中性粒细胞分两群

雅世倩仔

从人外周血分离中性粒细胞后，跑流式后中性粒细胞分两群，请问大大佬是怎么回事儿呢？还是说个体之间的差异呢？另外就是中性粒细胞激活后细胞群会发生变化吗？

下面是我做的流式图，请参考~

niwanmao

FITC是什么东西？
分两群，说明中性粒可能凋亡了。

雅世倩仔

niwanmao 发表于 2019-10-14 22:49
FITC是什么东西？
分两群，说明中性粒可能凋亡了。

FITC是CD15，那老师您看看我跑的流式图，右边儿的一部分是凋亡的细胞吗？

雅世倩仔

老师，如果我想区分哪些是凋亡细胞，应该买什么试剂呢？

sunzheng_99

雅世倩仔 发表于 2019-10-15 09:22
老师，如果我想区分哪些是凋亡细胞，应该买什么试剂呢？

AnnexinV 法  测凋亡

tiger

雅世倩仔 发表于 2019-10-15 09:22
老师，如果我想区分哪些是凋亡细胞，应该买什么试剂呢？

很明显左侧那群是死亡细胞，最简单的办法是用PI(碘化丙啶）判断。

雅世倩仔

tiger 发表于 2019-10-15 11:46
很明显左侧那群是死亡细胞，最简单的办法是用PI(碘化丙啶）判断。

谢谢老师，凋亡细胞也能染上CD15吗？我的细胞怎么凋亡了那么多呢

niwanmao

雅世倩仔 发表于 2019-10-15 19:40
谢谢老师，凋亡细胞也能染上CD15吗？我的细胞怎么凋亡了那么多呢

凋亡细胞的细胞膜还是完整的，所以可以染上CD15
中性粒细胞的生存时间特短，所以比较容易发生凋亡。

雅世倩仔

niwanmao 发表于 2019-10-15 22:03
凋亡细胞的细胞膜还是完整的，所以可以染上CD15
中性粒细胞的生存时间特短，所以比较容易发生凋亡。 ...

好的老师，那我是否可以直接用7-AAD Viability Staining Solution这个进行凋亡细胞的区分呢？
因为PI通道已经用了

niwanmao

雅世倩仔 发表于 2019-10-15 22:08
好的老师，那我是否可以直接用7-AAD Viability Staining Solution这个进行凋亡细胞的区分呢？
因为PI通道 ...

核酸染料是区分死活的。
要区分凋亡，还是需要用Annexin V抗体，并且需含钙离子的缓冲液。