求问如何检测骨髓成熟中性粒细胞

magicxdy

我是新手，想要提取小鼠骨髓细胞，然后用流式检测其中成熟中性粒细胞的比例，是应该选用CD45、CD11b、ly6g、ly6c吗？请问我应该选择哪些标记？怎样判断是成熟中性粒细胞？多谢！

niwanmao

可以的。

CD11b高表达可将所有小鼠粒细胞分出来：

Stirling DP, Yong VW. Dynamics of the inflammatory response after murine spinal cord injury revealed by flow cytometry. J Neurosci Res. 2008 Jul;86(9):1944-58. doi: 10.1002/jnr.21659. PubMed PMID: 18438914.


但是还会有嗜酸、嗜碱混在里面，所以加一个Ly6G，就可以把高表达的中性粒分开：
https://www.miltenyibiotec.com/CN-en/resources/macs-handbook/mouse-cells-and-organs/mouse-cell-types/granulocytes-mouse.html


如果想更详细的标记以及分得更细，可参考Redefining Myeloid Cell Subsets in Murine Spleen这篇文献，讲得很详细。还有设门上面，我们之前这篇帖子也很详细：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6502-1-1.html

magicxdy

niwanmao 发表于 2019-10-19 10:09
可以的。

CD11b高表达可将所有小鼠粒细胞分出来：

倪老师，还有一个问题，MDSC里面的粒细胞样的MDSCs也是ly6g+，我应该根据ly6c还是ly6g的表达高低来区分是幼稚的还是成熟的中性粒细胞呢？

niwanmao

magicxdy 发表于 2019-10-19 22:49
倪老师，还有一个问题，MDSC里面的粒细胞样的MDSCs也是ly6g+，我应该根据ly6c还是ly6g的表达高低来区分是 ...

设门参见这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-7565-1-1.html

magicxdy

niwanmao 发表于 2019-10-20 20:57
设门参见这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-7565-1-1.html

倪老师，谢谢您推荐的文献，我读了，还是想请教您， 我可以cd11b+ly6ghigh作为成熟中性粒细胞的标志吗？骨髓中这种成熟中性粒细胞的比例大概有多少？

niwanmao

magicxdy 发表于 2019-10-30 20:08
倪老师，谢谢您推荐的文献，我读了，还是想请教您， 我可以cd11b+ly6ghigh作为成熟中性粒细胞的标志吗？骨 ...

比例没有参考值，与你要做的小鼠模型有关。