小鼠肺组织染色

多纳泰罗豪

各位前辈帮我看看 ，最近我们处理肺单个核细胞，第一个门细胞数特别少，胞内因子染色，处理胶原酶XI, 刺激剂刺激5小时，怎样能减少死细胞数呢？

niwanmao

1、用温和的酶，例如Accutase等。
2、减少酶消化时间，辅以机械法。摸索两者搭配的时间，你会得到更好的细胞。

多纳泰罗豪

niwanmao 发表于 2019-11-3 20:20
1、用温和的酶，例如Accutase等。
2、减少酶消化时间，辅以机械法。摸索两者搭配的时间，你会得到更好的细 ...

这个和刺激剂 破膜剂 percoll 关系是不是不大？主要还是前期肺组织的处理有问题。

niwanmao

多纳泰罗豪 发表于 2019-11-3 22:07
这个和刺激剂 破膜剂 percoll 关系是不是不大？主要还是前期肺组织的处理有问题。 ...

我不知道你用什么东西刺激，一般PMA和离子霉素的浓度和时间也有关系，但是样本原本状态关系相对更大。

多纳泰罗豪

niwanmao 发表于 2019-11-3 22:44
我不知道你用什么东西刺激，一般PMA和离子霉素的浓度和时间也有关系，但是样本原本状态关系相对更大。 ...

我们用2mg/ml的胶原酶XI 处理然后镊子撕碎，37度55min，然后就是破红 加 percoll 啥的 。

多纳泰罗豪

niwanmao 发表于 2019-11-3 22:44
我不知道你用什么东西刺激，一般PMA和离子霉素的浓度和时间也有关系，但是样本原本状态关系相对更大。 ...

老师您好，还有关于FMO圈门的问题，控制阳性门 比例有啥特殊要求吗？有没有相关的帖子。