TNFa，IL1b，IL12都来自于macrophage？

潘潘杰

想咨询各位老师一个问题，TNFa，IL1b，IL12这三种细胞因子都主要有macrophage分泌吗？其他的细胞分泌是不是可以忽略不计（比如lymphocyte）？IFNr这个细胞因子应该主要是lymphocyte分泌的，对应的其他细胞分泌也可以忽略不计吧，楼主研究brain的，因为脑内的microglia就是对应外周的macrophage，发现TNFa，IL1b，IL12基因水平和蛋白水平表达不一致，偏差很大，这里不提什么翻译调控的概念，就单纯哪一类细胞分泌来讲，如题，谢谢大家帮忙解答。

niwanmao

基因水平和蛋白水平不一致，如果重复多次均如何，还是得考虑翻译调控吧。
至于你要研究该微环境中，细胞因子主要由什么细胞分泌，我觉得是不是该从细胞分离后再去研究呢？

潘潘杰

niwanmao 发表于 2019-11-6 12:04
基因水平和蛋白水平不一致，如果重复多次均如何，还是得考虑翻译调控吧。
至于你要研究该微环境中，细胞因 ...

老师，我分离了脑内的小胶质细胞，看了这三个分泌因子的基因水平，与全脑蛋白裂解后的三种因子水平不一致，怀疑是血脑屏障破坏后外周巨噬细胞进入脑内也分泌了这些导致的，所以才想问这三种因子是不是主要来自巨噬细胞？其他细胞分泌的比较少可以忽略不计？

niwanmao

潘潘杰 发表于 2019-11-7 08:20
老师，我分离了脑内的小胶质细胞，看了这三个分泌因子的基因水平，与全脑蛋白裂解后的三种因子水平不一致 ...

这设计有问题吧？
你分离出小胶质细胞测因子的基因，但是测蛋白水平却用全脑蛋白裂解，细胞来源和组成完全不同呀。
为什么蛋白不用分离出的小胶质细胞吗？

潘潘杰

niwanmao 发表于 2019-11-7 09:08
这设计有问题吧？
你分离出小胶质细胞测因子的基因，但是测蛋白水平却用全脑蛋白裂解，细胞来源和组成完 ...

倪老师，因为这三个因子是分泌蛋白，单分离小胶质细胞去测蛋白水平似乎也不合适呀，所以如果这三种细胞因子主要来自于小胶质细胞，那么我们去比对全脑的这些因子水平其实就相当于是小胶质细胞的分泌水平，因为这个实验设计，就是想看看血脑屏障破坏。

niwanmao

潘潘杰 发表于 2019-11-7 09:14
倪老师，因为这三个因子是分泌蛋白，单分离小胶质细胞去测蛋白水平似乎也不合适呀，所以如果这三种细胞因 ...

你既然已经分出小胶质细胞做基因了，完全可以分出一半做流式测内部的因子蛋白水平。或者如果懒得分，就直接用全部的细胞，标记小胶质细胞的特异性标记，测其内部因子表达

潘潘杰

niwanmao 发表于 2019-11-7 13:54
你既然已经分出小胶质细胞做基因了，完全可以分出一半做流式测内部的因子蛋白水平。或者如果懒得分，就直 ...

这个可以分出来做的，比如，现在分出来做了内部基因的蛋白水平了，一致或者不一致说明不了问题啊，相当于又回到了翻译调控上，而其实这个实验是为了看血脑屏障啊课题，跟蛋白的翻译调控没关系的，倪老师，所以我才有这个帖子所问的问题，这三个因子是不是主要由巨噬细胞分泌。