线粒体膜电位、线粒体质量、线粒体ROS检测染料及其优缺点

niwanmao

线粒体是细胞代谢的重要介质，是活性氧（ROS）的产生者和靶点，是ATP水平和钙稳态的调节剂，也是参与氨基酸、脂质和核苷酸合成的生物合成途径的枢纽。

线粒体存在于所有细胞中，它们的大小、形状和数量不同，这取决于细胞、基础组织和其他一些因素的代谢需求。 考虑到它们在细胞和机体功能中的关键作用，在许多遗传和非遗传疾病以及癌症和衰老中观察到线粒体（mt）功能障碍并不奇怪。 在绝大多数情况下，mt功能障碍的显著特征包括mt膜电位（mtmP）、mt质量和氧化还原电位的变化。

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wangyuqing

倪老师您好，非常感谢您的分享，有一个问题一直不是很明白，很多有关线粒体膜电位检测的说明书上都表示线粒体膜电位的检测是不依赖于线粒体数目的，但流式检测是以单个细胞为研究对象的，极端说，一个线粒体和一万个线粒体相比，细胞内部线粒体所负载的荧光信号不会叠加吗？期待您的回复

niwanmao

wangyuqing 发表于 2020-6-5 12:37
倪老师您好，非常感谢您的分享，有一个问题一直不是很明白，很多有关线粒体膜电位检测的说明书上都表示线粒 ...

流式，是一项单细胞检测技术，散点图上每一个点，都代表一个细胞，也就指示着一个线粒体的荧光信号。
所以，在流式上，1万个点，就代表着一万个线粒体的指标信号，相互既能区分开，又能参与到群体的统计中。不存在你所说的叠加，那是ELISA和WB技术的问题。

wangyuqing

谢谢老师，我的意思是，在这一个细胞内，所检测到的荧光信号是该细胞内所有线粒体负载探针的信号叠加吗？一个点对应一个细胞，但是一个细胞里面并不是只有一个线粒体，我想问的是，就单个细胞而言，其最终呈现的信号是该细胞内所有线粒体负载染料信号的叠加吗？

niwanmao

wangyuqing 发表于 2020-6-8 10:51
谢谢老师，我的意思是，在这一个细胞内，所检测到的荧光信号是该细胞内所有线粒体负载探针的信号叠加吗？一 ...

对。
如果你想测单个线粒体，可以分离出来再测，但是步骤会复杂很多。

silly_mood

老师，ROS的DCFH-DA的探针怎么样呢

xzmczff

倪老师，请教一下，测线粒体ROS的变化，DCFH-DA探针不算一个吗？另外mitotracer染料是检测线粒体质量还是线粒体数量？谢谢

飞鸿317

“对于MitoTracker染料，应测量MdFI的变化”这里的这个MdFI如何计算呢？

MMZ

老师，最近做线粒体膜电位，药物cck8抑制生长作用很明显，但是TMRM测膜电位反而用药组大大增高，但文献都是说药物引起线粒体肿胀，去极化，释放色素C，这种情况怎么解释比较好呢

niwanmao

MMZ 发表于 2022-3-5 20:37
老师，最近做线粒体膜电位，药物cck8抑制生长作用很明显，但是TMRM测膜电位反而用药组大大增高，但文献都是 ...

线粒体膜电位的变化，通常发生在很早期，所以，看看是否时间点有关？另外，目前的结果是否重复过多次？