请教人源化小鼠测人CD45,CD19,CD3流式染色，同型对照以及补偿

LXY123456

由于流式仪只有三个荧光通道可用，在进行流式测人源化小鼠免疫重建情况，不知道该怎么染色和设对照，请教各位老师提出宝贵经验，谢谢！

niwanmao

1、你准备测哪些指标？
2、如果有可能，尽量做多参数，可以节省样本，否则3色的话，小鼠样本量少，做不了几个指标。

LXY123456

niwanmao 发表于 2019-12-1 20:08
1、你准备测哪些指标？
2、如果有可能，尽量做多参数，可以节省样本，否则3色的话，小鼠样本量少，做不了几 ...

谢谢老师能够回复，前期准备测mCD45、hCD45、hCD19、hCD3，后期会增加测hCD4、hCD8

sunny2829

3个荧光通道的分别是什么呀？
一个样本一般有4组：
1，Blank组1管，调节电压
2，单染管（3色，即3管），调节补偿
3，对照管，同型对照，1管，用于画门
3，抗体管，1管，获取数据
可以考虑hCD45、hCD19，hCD3一组
mCD45单独染色，另外增加1管同型对照和1管抗体管，分析mCD45即可

LXY123456

谢谢您的建议！流式仪器是BD FACSCalibur ,可以用的3个荧光通道分别为：FITC、APC、PE;

LXY123456

sunny2829 发表于 2019-12-2 11:38
3个荧光通道的分别是什么呀？
一个样本一般有4组：
1，Blank组1管，调节电压

谢谢您的建议！流式仪器是BD FACSCalibur ,可以用的3个荧光通道分别为：FITC、APC、PE;

tiger

LXY123456 发表于 2019-12-2 12:59
谢谢您的建议！流式仪器是BD FACSCalibur ,可以用的3个荧光通道分别为：FITC、APC、PE; ...

Calibur能测APC的话，是四色吧？

tiger

LXY123456 发表于 2019-12-2 12:59
谢谢您的建议！流式仪器是BD FACSCalibur ,可以用的3个荧光通道分别为：FITC、APC、PE; ...

Calibur能测APC的话，是四色吧？

niwanmao

LXY123456 发表于 2019-12-2 12:59
谢谢您的建议！流式仪器是BD FACSCalibur ,可以用的3个荧光通道分别为：FITC、APC、PE; ...

Calibur这个配置应该是能测4色的，尽量4个抗体一起做，按照@sunny2829 站友的建议

LXY123456

tiger 发表于 2019-12-2 16:19
Calibur能测APC的话，是四色吧？

嗯嗯，但是Percp通道目前不能用