流式检测样本的保存

美丽的日子

各位大神们好！有个问题请教一下大家！
     我试验计划是取小鼠的脾脏、淋巴结、瘤块制备成单细胞悬液，上流式。但是算上实验组分组，每组的平行样，这样一次取出来的样本量就很大了。一次做完整个实验流程，感觉工作量太大了，我希望能把样本保存起来，分批次完成。不知道有没有什么方法，可以保存取出的样本呢？还请各位大神指导一下！
       先谢过各位大神们了！

niwanmao

美丽的日子 发表于 2019-12-11 10:44
上流式，测T细胞的各种表面标记物

首先解离成单细胞悬液。
然后两种选择：
1、程序降温，加冻存液冻存到液氮，保存时间长。
2、用我们的流式专用保存液1型，可保存3周。（但在小鼠样本上未实测，仅在人血、骨髓、组织样本中进行了大量测试）

niwanmao

后续的具体用途是什么？

美丽的日子

上流式，测T细胞的各种表面标记物

美丽的日子

niwanmao 发表于 2019-12-11 20:07
首先解离成单细胞悬液。
然后两种选择：
1、程序降温，加冻存液冻存到液氮，保存时间长。

感谢大神的解答！冻存液就是我们普通的细胞冻存液吗？程序降温，可以用异丙醇的冻存盒冻存，可以吗？
复苏以后就直接上机子测流式吗？

sunzheng_99

1 冻存液有商品化的，有的自己配
2 程序降温指某品牌程序降温仪器，该仪器电脑控制温度下降。
3 冻存盒是快速简单方法冻细胞。
4  复苏后一般需要洗下细胞，洗掉冻存液（保护剂）较好。

美丽的日子

sunzheng_99 发表于 2019-12-12 09:38
1 冻存液有商品化的，有的自己配
2 程序降温指某品牌程序降温仪器，该仪器电脑控制温度下降。
3 冻存盒是快 ...

那大神能推荐一下细胞冻存液的品牌吗？我们自己配的10%DMSO,80%的FBS的冻存液，可以用吗？
还有我们只有冻存盒，没有程序降温仪，可以用冻存盒这种简单的方法来冻存吗？对后续的流式检测影响大吗？

niwanmao

美丽的日子 发表于 2019-12-12 11:58
那大神能推荐一下细胞冻存液的品牌吗？我们自己配的10%DMSO,80%的FBS的冻存液，可以用吗？
还有我们只有 ...

冻存液可以自己配的。没有程序降温仪器，可以自己按如下步骤操作：
4度30分钟→－20度 60分钟→ －80度过夜→ 液氮罐

美丽的日子

niwanmao 发表于 2019-12-12 15:47
冻存液可以自己配的。没有程序降温仪器，可以自己按如下步骤操作：
4度30分钟→－20度 60分钟→ －80度过 ...

感谢你的指导！