本实验室的学生之前做了几次钙离子检测均未做出结果,此次终于用BD LSRFortessa流式仪检测出钙离子动态变化趋势。弄懂了横坐标Time的数字,表示的是多长时间。。 上机方案过程建立如下:先用检测样本管上机,AquireData20s,然后暂停获取样本,快速将刺激剂加入样本管中,混匀后将该管上机(该过程越快越好,因为钙离子变化很快),Append继续收集5分钟(300s)。起初用该方法检测一直没有趋势,怀疑过是不是机器没有调试好检测不出来,这次换了一种刺激剂终于做出来了。说明方案没问题,是之前刺激不够。
葡萄糖刺激,未有变化
氯化钾刺激,有趋势
根据设定的时间,未刺激20s和刺激后上机300s共计320s。如图,横坐标32,000的位置相当于320s。之前因为没有变化趋势,且因为是叠加收集没有分割线,无法弄清楚收样20s对应的横坐标位置。此次有明显的趋势变化,20s对应横坐标2*1,000的位置,即表示每个间隔表示0.01s。
根据本次结果,刺激后变化不明显,下次可改进一下收集时间。未刺激样本收集时间可适当延长,缩短刺激后收集时间。 欢迎大家补充讨论~
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