多色染色结果分析

guo919370840

老师，我最近用 BD Calibur 检测了 MSC细胞的几个典型标志物，结果的到全是阴性结果。麻烦老师帮我看看原因出在哪里了。 我用的四色，下面图片是我用的获取模板，是不是获取模板不对呢？

niwanmao

这个是没获取到信号，不是阴性的问题。

guo919370840

niwanmao 发表于 2020-1-8 22:47
这个是没获取到信号，不是阴性的问题。

老师，麻烦能不能帮我看看我设计的获取模板点图有没有问题呢？ 另外没有获取到信号的原因是什么导致的呢

niwanmao

guo919370840 发表于 2020-1-9 20:57
老师，麻烦能不能帮我看看我设计的获取模板点图有没有问题呢？ 另外没有获取到信号的原因是什么导致的呢 ...

我不知道你每个通道设计了哪些抗体。

guo919370840

niwanmao 发表于 2020-1-9 21:22
我不知道你每个通道设计了哪些抗体。

用BD caliber  测hMSC的标志物，买了一个hMSC 抗体试剂盒，其中 试剂盒中阳性混合物是CD90 FITC  ;  CD105 PerCP-Cy5.5; CD73 APC;阴性混合物是：CD34 PE ； CD11b PE ；CD19PE;CD45 PE  ;HLA-DR  PE  。这个图片是按说明书设计的panels  

niwanmao

guo919370840 发表于 2020-1-10 10:43
用BD caliber  测hMSC的标志物，买了一个hMSC 抗体试剂盒，其中 试剂盒中阳性混合物是CD90 FITC  ;  CD10 ...

看来你是乱填的

P3填CD90 FITC
P4填CD34/CD11b/CD19/CD45/HLA-DR PE
P5填CD105 PerCP-cy5.5
P7填CD73 APC

如果你用的是BD的MSC试剂盒，我记得上面是有图形参考的，你可以直接参考，主要是排除掉碎片之后，圈CD34/CD11b/CD19/CD45/HLA-DR阴性的细胞，分析CD90、CD105、CD73的表达率。

guo919370840

niwanmao 发表于 2020-1-10 11:25
看来你是乱填的

P3填CD90 FITC

哦 谢谢老师

guo919370840

niwanmao 发表于 2020-1-10 11:25
看来你是乱填的

P3填CD90 FITC

老师  实在不好意思 ，我上错图片了  已更正了  ，我就是按照现在这个设计做的，结果全是阴性  我让老师帮我看看是不是我获取数据的门或者其它有没有问题，这个图片就是我画的门获取数据的模板，刚开始自学这个，望老师不吝赐教

niwanmao

guo919370840 发表于 2020-1-11 09:25
老师  实在不好意思 ，我上错图片了  已更正了  ，我就是按照现在这个设计做的，结果全是阴性  我让老师 ...

你先把数据获取好再讨论吧，现在这个图上坐标没有设置抗体名称，数据点又没有，没法给你更多指导呀。