小白求助 关于BD IFN-γ 抗体使用的求助

hellzhu

求助大神，最近买了BD的几支流式抗体。其中有三支的说明书没有标明使用量“Since applications vary, eachinvestigator should titrate the reagent to obtain optimal results.”求助各位大神，这种情况应该怎么确定使用量呢？？我想检测的是外周血白细胞标本的。感谢！

niwanmao

意思就是你需要做一下滴定，明确最佳的抗体用量，例如你要检测外周血T细胞刺激之后干扰素gamma的分泌量，那么就用T细胞相关的抗体标记，之后再用不同量的干扰素gamma抗体去标记，通过不同浓度的图形对比，确定一个最佳用量

hellzhu

niwanmao 发表于 2020-1-13 09:08
意思就是你需要做一下滴定，明确最佳的抗体用量，例如你要检测外周血T细胞刺激之后干扰素gamma的分泌量，那 ...

感谢大神回复。请问这个有没有一个参考量的呢？？我用的是BD的554701        BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human IFN-γ 这一款的。感谢！！

niwanmao

hellzhu 发表于 2020-1-13 14:30
感谢大神回复。请问这个有没有一个参考量的呢？？我用的是BD的554701        BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Hum ...

要学会看说明书，说明书上明确说了抗体浓度是0.2mg/ml，建议滴定，一般≤ 0.5 µg mAb/million cells，那么换算成体积就是≤2.5ul/百万细胞。

hellzhu

niwanmao 发表于 2020-1-13 18:44
要学会看说明书，说明书上明确说了抗体浓度是0.2mg/ml，建议滴定，一般≤ 0.5 µg mAb/million cells，那 ...

感谢大神指导