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悬赏10流星已解决
头一次用流式细胞仪,没有任何基础,看了很多帖子现在处于似懂非懂状态:
我们是参照ISO 19344-2015中的protocol B做试验,目的是分辨和计数益生菌菌剂中活菌和死菌数量。
染色剂是syto 24和PI,syto 24是膜穿透染料,活死细菌均能染色,激发波长515nm,绿光,FL1接收;PI不能透膜,只能染死细菌,激发波长620nm,红光,FL3接收,且死菌染上PI后能减少syto 24的激发;但如果是“半死不活”的细胞,PI染料较少的话,红光、绿光都有。
我们做了空白对照,不染色的活细菌、死细菌
单染,syto 24染的新鲜活细菌、PI染的煮死的细菌
双染,将活细菌死细菌混合,同时染syto 24和PI
我们是在BD 的C6仪器上做的。
做完用flowjo分析:
不知道补偿是否做的有问题?
但补偿应用于所有样品后,打开样品管,发现上面说大部分细胞都在坐标轴上,这是说大部分都没染上吗?
刚刚看了倪老师的回帖,我做了一下MFI,选择中位数,发现空白管和单染管的中位数差距很大,这是补偿调错了吗?
谢谢大家!
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