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悬赏5流星已解决
本帖最后由 chaoslure 于 2020-2-14 08:29 编辑
在做干细胞的流式补偿时遇到这样一个问题，由于干细胞经分离培养细胞的纯度很高，在进行流式分析时，我们按照常规流式操作，第一管阴性对照，第二管FITC单标+PE-IG，第三管PE单标+FITC+IG，第四管PE+FITC双标。在第二管和第三管可以看到阳性率很高几乎看不到阴性细胞群。通常在调节补偿时需要一次上样既有阴性细胞群又有阳性细胞群，出现这种情况我们应该如何调节补偿？
我想到两个思路希望各位老师指点一下：
方法一：
在实验过程中，既然第二管和第三管没有阴性细胞群，那么我们可以制造阴性细胞群，比如在上样前将第一管的细胞取部分加入到第二管和第三管中。
方法二：
在分析过程中，在分析时第二管和第三管没有阴性细胞群，我们可以将第一管的图做为阴性对照，分别计算三管细胞的EP和FITC的MFI值，手动调整补偿矩阵让第一管的MFI-PE≈第二管的MFI-PE，第一管的MFI-FITC≈第三管的MFI-FITC。
不知哪种方法更好，或者有更好的调节补偿方法？请各位老师指点一下。
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不混在一起，处理过程中的差异、上机时的差异，都会影响两者的相对位置，造成补偿不准。
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发表于 2020-2-13 17:00:36
发表于 2020-2-13 17:00:37
