一图汇总：为什么要用Fc阻断剂？用什么？如何用？

niwanmao

尽管之前发过不少关于Fc阻断重要性的帖子（流式中文网论坛搜索“阻断”即可），内容基本上都讲的比较清楚了。但是人嘛，还是想越简洁越好。

下面这张图转自fccf.mskcc.org，虽然也有较多文字，但相对简单明了的排版比较适合快速了解。
简单概括一下：
Fab端结合抗原，用于检测的，但由于抗体是Y形的，所以还有个Fc端，会与细胞表面的Fc受体发生非特异性染色，导致假阳性。
非特异性染色的细胞很多，包括B细胞、DC、单核、巨噬、NK、中性粒、嗜酸粒、血小板、肥大、嗜碱等细胞。
Fc Blocking就是为了避免这种情况的。
Fc阻断剂的种类这幅图里面介绍的不够详细，一般证实以下三种比较好（主要是针对人或小鼠的样本，其它物种需要对应的种属）：
（1）商品化的Fc Block（25ug/ml或10ug/ml）；
（2）2.5％或10%的人血清或小鼠血清；
（3）100ug/ml的人IgG。

毛豆24821

有个问题，细胞是猴子PBMC，使用的Human FC block中是包括了Human IgG的，现在很多一抗是全人源化的抗体，所以如果二抗是anti-human IgG Fc，那这时候应该用什么来block。猴血清跟anti-human IgG Fc也会有结合的。
或者这种情况可以不做Block吗？

毛豆24821

有个问题，细胞是猴PBMC，使用的Human Fc block中包含了Human IgG，现在很多一抗是全人源化的抗体，接着用荧光标记anti-human IgG Fc作为二抗。 这种时候二抗会与Fc block结合，产生假阳性。
请问这种时候应该选择什么来作为block，另外猴血清也会与二抗有结合。或者这种情况是否可以不做block？

毛豆24821

有个问题，细胞是猴PBMC，使用的Human Fc block中包含了Human IgG，现在很多一抗是全人源化的抗体，接着用荧光标记anti-human IgG Fc作为二抗。 这种时候二抗会与Fc block结合，产生假阳性。
请问这种时候应该选择什么来作为block，另外猴血清也会与二抗有结合。或者这种情况是否可以不做block？

jnutsq

倪老师，2.5%和10%，请问为什么差别很大。我是做人的全血。谢谢！

jnutsq

倪老师，请问应该是用2.5％还是10%的浓度呢？每个加多少μL呢？人的全血样本。谢谢！