人全血单核细胞、组织巨噬细胞检测方案和设门

niwanmao · 发表于 2020-2-27 22:59:33

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方案：

人全血单核细胞设门：

组织巨噬细胞分析设门策略：

参考文献：Burwitz, Benjamin J et al. “Technical advance: liposomal alendronate depletes monocytes and macrophages in the nonhuman primate model of human disease.” Journal of leukocyte biology vol. 96,3 (2014): 491-501. doi:10.1189/jlb.5TA0713-373R

Veblen · 发表于 2020-2-28 00:15:08

老师，LIVE/DEAD Yellow用哪个通道检测呢？

niwanmao · 发表于 2020-2-28 09:52:44

Veblen 发表于 2020-2-28 00:15
老师，LIVE/DEAD Yellow用哪个通道检测呢？

用405nm紫光激发，570nm收集。

lordimp · 发表于 2020-6-15 17:09:05

niwanmao 发表于 2020-2-28 09:52
用405nm紫光激发，570nm收集。

倪老师，我用人血淋巴细胞分离液提取了外周血的单个核细胞之后，圈出来CD45+CD14+CD11b+的细胞，从中用CD86标记M1，CD163标记M2可行吗。我做下来的问题是CD45+CD14+CD11b+的细胞只有一群，而且是CD86 CD163双阳的，没法区分M1 M2，请问在不换marker的情况下怎么拯救一下

qiulinluo · 发表于 2020-12-2 10:29:36

老师，请问一下为什么要从（淋巴+单核）gating，为什么不能直接通过CD45 vs SSC-A圈出单核细胞？

qiulinluo · 发表于 2020-12-2 10:42:19

老师们，请问一下，为什么要从（淋巴+单核）gating出来分析，为什么不直接通过CD45 vs SSC-A圈出单核细胞进行分析？
CD8 vs CD16的目的是什么？按上图分析，最后一群monocytes中不是还存在有NK细胞吗？

niwanmao · 发表于 2020-12-3 10:55:34

lordimp 发表于 2020-6-15 17:09
倪老师，我用人血淋巴细胞分离液提取了外周血的单个核细胞之后，圈出来CD45+CD14+CD11b+的细胞，从中用CD ...

提出来的PBMC里面，只有单核，你圈的这群是单核。M1和M2需要诱导分化出来。

qiulinluo · 发表于 2020-12-18 15:48:10

老师，请问一下关于全血中单核细胞的圈门，为什么用CD3/CD20排除T/B细胞，NK细胞呢，不需要排除? CD3排除T细胞的话，CD8在这里的作用是？

wsjheaven · 发表于 2021-2-18 13:43:25

倪老师，我想请教一下，这些surface marker是同时染色的吗？因为我做的时候，就发现PE-CY7和PERCP-CY5.5很难分开，APC-A700和PERCP-CY5.5也是。做了补偿以后也很难看，总感觉结果奇奇怪怪。请问是我补偿的问题吗，还是别的原因。谢谢

macm · 发表于 2021-9-1 10:57:32

倪老师好，组织巨噬细胞设门策略，上面标注是“除结肠”吗？那请问一下结肠（colon）固有层中的巨噬细胞怎么设门吗？有什么特别需要注意的吗？

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[图片] 人全血单核细胞、组织巨噬细胞检测方案和设门

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