最基础的CD4细胞怎么染出来怪怪的

多纳泰罗豪

各位老师 帮我分析一下是什么原因。之前染的CD4都很好，现在染了一次CD4的图形怪怪的 有两个群 或者中间总有一些细胞是怎么回事？处理标本是肺组织细胞。胶原酶，percoll处理.

Sherry1007

感觉对角线那群细胞像是非特异性染色产生的细胞，或者是一群死细胞

熬汤不放姜

1. 你的CD3+CD4+分了2群（强阳和弱阳性），怀疑细胞数太多或染色体积太大，抗体没有达到最佳染色浓度；你用的抗体浓度和对应细胞数是多少呢？

2.CD3+CD4+细胞群成椭圆形，可以检查下FITC和PE之间的补偿是否正确调节

3. 肺脏组织建议加上死活染料和CD45来研究T cell, 圈门会更准确

niwanmao

圈CD4中间那群，反过去看他们在FSC/SSC图上的分布，如果在FSC大的区域，可能是单核，如果在小的区域，就应该是死细胞非特异性染色。

多纳泰罗豪

niwanmao 发表于 2020-2-29 12:53
圈CD4中间那群，反过去看他们在FSC/SSC图上的分布，如果在FSC大的区域，可能是单核，如果在小的区域，就应 ...

好的 谢谢倪老师 我圈回去看了 FSC小的那块 应该是死细胞

多纳泰罗豪

熬汤不放姜 发表于 2020-2-28 21:10
1. 你的CD3+CD4+分了2群（强阳和弱阳性），怀疑细胞数太多或染色体积太大，抗体没有达到最佳染色浓度；你用 ...

嗯嗯 谢谢前辈！ 补偿还可以，下次我们加上CD45。抗体浓度就是大概是1比500倍稀释。大概1x10的6次方 细胞