细胞周期拟合的问题

cocoa

图1-4是我圈门的过程，细胞是肿瘤细胞，对照组未给任何处理。在用flowjo拟合后生成了图3，但是S期是负值，且G1和G2的CV值太大，于是我调整了G2期，有了图4，这样S期和CV值都正常了。想问下大家两个问题：
1.把红色拟合线调到和黑色实际的拟合线最大程度重叠，这样做正确吗？还是说会导致数据不可信？
2.手动调整G2期宽度和峰值位置这样做正确吗？
不知道大家拿到软件生成的拟合曲线是怎么处理的，做过的大神们求指教~~

niwanmao

4的结果是对的。
可以手动调，但是不是随便乱调，一个是综合RMS和各期的CV，第二个是根据已知倍体位置。

cocoa

niwanmao 发表于 2020-2-29 12:55
4的结果是对的。
可以手动调，但是不是随便乱调，一个是综合RMS和各期的CV，第二个是根据已知倍体位置。 ...

谢谢老师的回复，就是我同一组细胞，给药了之后周期图整体向右侧偏移了。。这个不知道是什么原因？细胞系一致的情况下会偏移这么多吗？我的Hoechst染料都是统一加的，应该不是染料不均一的原因~

niwanmao

cocoa 发表于 2020-3-1 09:56
谢谢老师的回复，就是我同一组细胞，给药了之后周期图整体向右侧偏移了。。这个不知道是什么原因？细胞系 ...

怪标本，就不对了。
还是你染色的问题，染色的时候，染料和细胞的比例没有调整到一致，所以造成这样的偏移。
但这个偏移并不影响你的分析，如果你确认没有异倍体存在，就只需移动G1和G2的峰位置标识即可。

cocoa

niwanmao 发表于 2020-3-1 10:46
怪标本，就不对了。
还是你染色的问题，染色的时候，染料和细胞的比例没有调整到一致，所以造成这样的偏 ...

明白了，感谢老师的回复