请教关于全血流式法检测单核细胞表面抗原

lrseh

各位老师好，我想用全血流式法检测全血样本中血小板和单核细胞的CD36表达情况。我将全血稀释100倍后分别加入anti-CD61-FITC标记血小板，见明显阳性细胞群；但用anti-CD14-APC标记单核细胞，却找不到阳性细胞。
查阅资料，一般分析单核细胞都采用分离PBMC的方法，或者抗体反应后裂解红细胞的方法；也有人说单核细胞比例太低，全血法直接检测单核细胞不可行。
我想请教有经验的老师，全血法直接检测单核细胞CD36是否可行，如可行该如何制样操作？非常感谢！

niwanmao

全血检测单核细胞，直接取 100ul，不要稀释，单核细胞不能和血小板一起检测。

lrseh

谢谢老师解答，老师您能否说详细一些，不稀释的全血加抗体孵育后，再如何处理？直接上机还是裂解红细胞？
另外您说单核细胞不能和血小板一起检测，主要是什么原因呢？
非常感谢！

niwanmao

lrseh 发表于 2020-3-12 13:11
谢谢老师解答，老师您能否说详细一些，不稀释的全血加抗体孵育后，再如何处理？直接上机还是裂解红细胞？
...

单核细胞和血小板数量级完全不是一个等级的，这怎么好放一起测啊。你稀释100倍，血小板数量足够的，但是单核细胞剩下几个？

单核细胞就直接取100ul血样，直接与抗体孵育15分钟，红细胞裂解10分钟，离心去上清即可。

Phoebe

请问对于正常人骨髓巨核细胞的检测，标本制备和仪器条件设置和其他细胞是一样的么

niwanmao

Phoebe 发表于 2020-3-16 00:24
请问对于正常人骨髓巨核细胞的检测，标本制备和仪器条件设置和其他细胞是一样的么 ...

一样的。

Phoebe

好的，谢谢您，倪老师。