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[细胞周期] 植物倍性检测对照

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发表于 2020-3-22 22:14:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
想问老师,在做倍性检测时为什么经常要用到鸡红细胞核作为参照物呢?
就算成一定规律,那怎么通过及红细胞核染色荧光与实验组DNA荧光比较,怎么会具有可比性呢,就不知道实验的基因组是几倍体了啊
谢谢老师

发表于 2020-3-23 07:51:44 | 显示全部楼层
哺乳动物的用鸡红细胞参照,因为鸡红细胞是有核的,而且倍性恰好是单倍体,非常均一。

如果做植物,你就得用已知倍体的植物去做参照,而不是鸡红细胞。
 楼主| 发表于 2020-3-27 01:28:05 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-3-23 07:51
哺乳动物的用鸡红细胞参照,因为鸡红细胞是有核的,而且倍性恰好是单倍体,非常均一。

如果做植物,你就得 ...

那为什么经常用鸡红细胞做线性呢?这个线性指的就平均荧光强度了吧,是根据细胞数的比例关系去呈现相应的总的荧光强度吧,可以这样理解吗;
另怎么去做倍性的对照呢,其他哺乳动物的细胞就算有单倍体,染色后与鸡红细胞荧光强度也不会一样,没有可比性啊;
发表于 2020-3-27 08:02:33 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2020-3-27 01:28
那为什么经常用鸡红细胞做线性呢?这个线性指的就平均荧光强度了吧,是根据细胞数的比例关系去呈现相应的 ...

这是由核酸含量决定的,前人做过很多工作,已经明确了鸡红细胞和鳟鱼红细胞是很好的单倍体参照。
发表于 2020-3-27 11:18:11 | 显示全部楼层
1 做样本的倍体性和细胞周期分析时,建议做三管平行分析管:一管二倍体标准品,一管未知样本与二倍体标准品的混合样本,以及一管未知样本。对于肿瘤样本来说,理想的二倍体标准品是与其组织类型相同的正常组织。另一个二倍体标准品是外周血单个核细胞(PBMCs)。
2 鸡红细胞也可
3 给你作参考
 楼主| 发表于 2020-3-28 20:10:28 | 显示全部楼层
sunzheng_99 发表于 2020-3-27 11:18
1 做样本的倍体性和细胞周期分析时,建议做三管平行分析管:一管二倍体标准品,一管未知样本与二倍体标准品 ...

为啥要做一管混合样本呢?
发表于 2020-3-29 11:45:03 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2020-3-28 20:10
为啥要做一管混合样本呢?

只有做这三管,才能准确地确定二倍体峰的位置。
 楼主| 发表于 2020-3-29 12:01:18 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-3-29 11:45
只有做这三管,才能准确地确定二倍体峰的位置。

好的,理解了
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