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[结构和原理] 四色补偿

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发表于 2020-3-24 11:09:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
请教老师:我用的是BD caliber 做的四色实验,FTIC  PE   APC   PerCP   。 当用APC管单染上样做补偿时,结果一直是阴性(已验证,连接APC的抗体是阳性的)。请问这是什么原因呢?想不明白啊。理论上是阳性才对啊

22222_副本.jpg
发表于 2020-3-24 14:45:33 | 显示全部楼层
你把Gate去掉,显示所有的信号看看。

CD73也不是所有的B和T细胞都表达的,所以是有可能出现这种情况的。但从这些图来看,感觉还是因为第一个门设门没圈中准确的淋巴细胞原因。
 楼主| 发表于 2020-3-24 18:05:53 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-3-24 14:45
你把Gate去掉,显示所有的信号看看。

CD73也不是所有的B和T细胞都表达的,所以是有可能出现这种情况的。但 ...

老师  我题目中可能没写清楚,我测得是MSC细胞  ,门内的细胞应该都是MSC细胞,我用的双色FITC  PE  同样测得这部分细胞,测得CD73 达到95%以上了。  老师,可能是激光的问题吗?因为APC  是633的激光   
发表于 2020-3-24 20:38:39 | 显示全部楼层
guo919370840 发表于 2020-3-24 18:05
老师  我题目中可能没写清楚,我测得是MSC细胞  ,门内的细胞应该都是MSC细胞,我用的双色FITC  PE  同样 ...

我不知道你这里R1门内细胞比例占多少,从你这里看,感觉这个门是随意放置的,这样的图拿出去,谁都不信是正确的圈门。
其次,你所说的双色FITC、PE,是指什么标记搭配?

总之,你这里的数据,一个是设门不明,我知道你认为自己培养的是MSC,但是设门还是需要有依据的;其次,激光的问题不要首先怀疑,而是要首先从自己的分析上找问题,例如你如果做了4色,那么至少要做一管FMO对照用于设门。
 楼主| 发表于 2020-3-25 16:01:22 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-3-24 20:38
我不知道你这里R1门内细胞比例占多少,从你这里看,感觉这个门是随意放置的,这样的图拿出去,谁都不信是 ...

好的  谢谢 老师
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