用CBA测小鼠外周血IL-2\\\\4\\\\6\\\\10，含量低于检测线?

davezn

niwanmao 发表于 2020-5-2 10:55
看不到你的操作，很难说出问题所在。

一般弃上清的操作，最多微球被吸掉，影响最后获取到的微球数量，不 ...

倪老师，我看了一下各样本的events数没有太大的差别。您在别的帖子里说MFI负值可能是电压、补偿或者分辨率的问题，可是标准品和样本是同时处理的，曲线没有问题。

niwanmao

davezn 发表于 2020-4-23 15:06
好的，倪老师，万分感谢，您看看这样行不行。

IL4、IL6、IL17没法用，出现很多负值。其它几个因子还可以用。


考虑到负值这么多，我怀疑是不是你处理样本的时候，出了什么问题？

niwanmao

标准曲线没问题，问题应该出在样本的浓度低于这条曲线的最低检测限，导致FCAP软件就不给你报具体数字了。你把标准曲线的荧光强度和对应的浓度，以及样本的荧光强度，整理到一个Excel文件里面，传上来，我帮你做一条公式，就可以解决。

davezn

niwanmao 发表于 2020-4-23 08:11
标准曲线没问题，问题应该出在样本的浓度低于这条曲线的最低检测限，导致FCAP软件就不给你报具体数字了。你 ...

好的，倪老师，万分感谢，您看看这样行不行。

davezn

niwanmao 发表于 2020-4-22 16:41
IL4、IL6、IL17没法用，出现很多负值。其它几个因子还可以用。

之前我们怀疑是不是最后弃上清的时候给吸出去了，这次已经非常小心了，其他步骤实在是找不到什么原因，您觉得还有哪里会出问题吗？

niwanmao

davezn 发表于 2020-5-2 00:09
之前我们怀疑是不是最后弃上清的时候给吸出去了，这次已经非常小心了，其他步骤实在是找不到什么原因，您 ...

看不到你的操作，很难说出问题所在。

一般弃上清的操作，最多微球被吸掉，影响最后获取到的微球数量，不会影响MFI。

davezn

niwanmao 发表于 2020-5-2 10:55
看不到你的操作，很难说出问题所在。

一般弃上清的操作，最多微球被吸掉，影响最后获取到的微球数量，不 ...

倪老师，我看您在别的帖子里说MFI负值可能是电压、补偿或者分辨率的问题，可是标准品和样本是同时处理的，曲线没有问题。

niwanmao

davezn 发表于 2020-5-3 21:50
倪老师，我看您在别的帖子里说MFI负值可能是电压、补偿或者分辨率的问题，可是标准品和样本是同时处理的， ...

-80度可以保存较长时间，一周不在话下。原因由于不在现场暂时无法给你一个明确的答复，建议从样本处理的每一步、仪器的稳定性这两方面先进行排查。

davezn

niwanmao 发表于 2020-5-4 14:42
-80度可以保存较长时间，一周不在话下。原因由于不在现场暂时无法给你一个明确的答复，建议从样本处理的 ...

好的 谢谢您

gjy5386

做出负值很正常，最好换个拟合曲线的公式。