关于检测人外周血免疫细胞FMO需要每次都做吗？

zhangly92

目前在做人外周血八色流式，第一次定条件时，是打算做FMO确定阴阳性群分界的。
那在后面的检测中，是否还需要进行FMO？因为检测的是人的样本，如果每次都做FMO太耗费抗体和细胞了。
想问下，是否可以第一次用正常人的PBMC，做FMO确定好阴阳性群分界，及调好补偿；从而在后续的实验中，直接上样本，无需再做FMO及补偿？

niwanmao

补偿可以通用。FMO一般建议每次做一个，因为不同时间，可能在状态上会略有差异。如果分群尚可的话，只做一次也可以。

facetodog

光路和液流系统稳定的情况下，一两个月内可以只做一次

zhangly92

niwanmao 发表于 2020-4-27 07:11
补偿可以通用。FMO一般建议每次做一个，因为不同时间，可能在状态上会略有差异。如果分群尚可的话，只做一 ...

老师，那如果做小鼠实验，检测不同部位淋巴结内的免疫细胞，需要每个部位均做一组FMO吗？

niwanmao

zhangly92 发表于 2020-5-2 16:36
老师，那如果做小鼠实验，检测不同部位淋巴结内的免疫细胞，需要每个部位均做一组FMO吗？ ...

只要是同时做，一个即可

zhangly92

niwanmao 发表于 2020-5-2 19:52
只要是同时做，一个即可

老师那也就是说，每一次小鼠实验均需要做FMO？还有一个小问题，如果将8色panel中的一个抗体替换为其他品牌相同荧光素的抗体，之前做好的FMO需要全部重做吗？

niwanmao

zhangly92 发表于 2020-5-27 08:36
老师那也就是说，每一次小鼠实验均需要做FMO？

严格来说是的。

zhangly92

niwanmao 发表于 2020-5-27 08:38
严格来说是的。

老师还有一个问题请教，如果将8色panel中的一个抗体替换为其他品牌相同荧光素的抗体，之前做好的FMO需要全部重做吗？

niwanmao

zhangly92 发表于 2020-5-27 08:40
老师还有一个问题请教，如果将8色panel中的一个抗体替换为其他品牌相同荧光素的抗体，之前做好的FMO需要 ...

如果不是串联染料，是可以的。
但是如果是串联染料，需要重做。

zhangly92

niwanmao 发表于 2020-5-27 12:12
如果不是串联染料，是可以的。
但是如果是串联染料，需要重做。

好的，感谢老师的解答