流式细胞术细胞膜表面受体检测灵敏度问题

frozenflying

各位大佬，问个小问题，应用流式检测细胞膜表面膜受体的灵敏度如何？和Western blot做交叉验证是否有必要？我主要做folate receptor alpha的靶向治疗，因为实验室没有Western blot的设备，boss仅想通过流式验证细胞膜表面的receptor的表达，是否合理？有什么文献支持流式在这方面的应用嘛？还有就是灵敏度的问题有文献支持嘛？谢谢啦????！

niwanmao

frozenflying 发表于 2020-5-5 10:11
灵敏度，我个人的理解是能够检测多低浓度的受体，因为WB可以检测pmol级的蛋白，如果folate receptor alpha ...

你们这个蛋白质我没做过，但我们平时做的细胞因子定量，做过不少，灵敏度在0.1pg/ml。
无论是原理还是实际应用上，流式肯定比WB要高，这是勿庸质疑的。

但目前的关键是：
1、有没有对应的抗体？
2、有没有对应的标准品，绘制标准曲线

niwanmao

灵敏度我不明白指的是什么？
但是，对于针对受体的功能验证，都是可以考虑用受体占用（receptor occupancy) 来做的。

frozenflying

灵敏度，我个人的理解是能够检测多低浓度的受体，因为WB可以检测pmol级的蛋白，如果folate receptor alpha在我要检的细胞系的含量很低，我担心流式检测不到，不知道会不会出现这样的情况，我的核心问题是想知道，流式的检测结果能否和WB的一致，尤其在缺乏用WB做crosscheck的情况下。